[发明专利]来自巴斯德毕赤酵母的酵母启动子

权利要求书

1.一种分离核酸，其中所述分离核酸的序列包含SEQ ID NO:2或其片段，其中所述分离核酸包含组成型巴斯德毕赤酵母启动子序列，其中所述分离核酸或其片段与异源编码序列操作性连接，以及其中所述片段在SEQ ID NO: 2的3’末端上游延伸约300个核苷酸、约400个核苷酸、约500个核苷酸、约600个核苷酸、约700个核苷酸，或所述片段包含SEQ ID NO: 2的3’末端上游至少222个核苷酸。

2.权利要求1的分离核酸，其中所述异源编码序列编码选自毒素、抗体、激素、酶、生长因子、细胞因子、结构蛋白、免疫原性蛋白和细胞信号传导蛋白的蛋白质。

3.权利要求2的分离核酸，其中所述蛋白质为用于动物饲料的酶。

4.权利要求3的分离核酸，其中所述蛋白质选自甘露聚糖酶、淀粉酶、葡聚糖酶、蛋白酶、纤维素酶和木聚糖酶。

5.权利要求3的分离核酸，其中所述蛋白质为植酸酶。

6.权利要求3的分离核酸，其中所述蛋白质为半乳糖苷酶。

7.包含权利要求1的分离核酸的表达载体。

8.包含权利要求7的表达载体的宿主细胞，其中所述宿主细胞是酵母宿主细胞。

9.包含权利要求1的分离核酸的宿主细胞，其中所述宿主细胞是酵母宿主细胞。

10.权利要求8的宿主细胞，其中所述宿主细胞为毕赤酵母属物种。

11.权利要求10的宿主细胞，其中所述毕赤酵母属物种为巴斯德毕赤酵母。

12.包含权利要求1的分离核酸的DNA构建体。

13.生产蛋白质的方法，所述方法包括在培养基中培养含有包含与编码蛋白质的异源编码序列操作性连接的权利要求1的分离核酸的第一表达盒的宿主细胞的步骤，其中所述培养在允许该蛋白质表达的条件下进行。

14.权利要求13的方法，其中所述蛋白质选自毒素、抗体、激素、酶、生长因子、细胞因子、结构蛋白、免疫原性蛋白和细胞信号传导蛋白。

15.权利要求14的方法，其中所述蛋白质为用于动物饲料的酶。

16.权利要求15的方法，其中所述蛋白质选自甘露聚糖酶、淀粉酶、葡聚糖酶、纤维素酶、蛋白酶和木聚糖酶。

17.权利要求15的方法，其中所述蛋白质为植酸酶。

18.权利要求15的方法，其中所述蛋白质为半乳糖苷酶。

19.权利要求13的方法，其中所述蛋白质使用第一表达盒与第二表达盒组合表达。

20.权利要求19的方法，其中所述第二表达盒包含：与具有包含SEQ ID NO:3或SEQ IDNO:4的序列或任何其它AOX1或AOX2启动子序列的序列的分离核酸操作性连接的编码蛋白质的异源编码序列，其中SEQ ID NO:3和SEQ ID NO:4具有启动子活性。

21.权利要求20的方法，其中所述蛋白质使用第一表达盒、第二表达盒和第三表达盒表达。