[发明专利]利用活性炭通过调整溶液条件来从蛋白混合物选择性地去除蛋白

权利要求书

1.一种从包含至少两种蛋白的样品选择性地去除蛋白的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)提供包含至少两种蛋白的样品，其中一种待选择性地去除；

(b)调整所述样品的溶液pH，使得所述pH在待选择性地去除的蛋白的等电点的2.0pH单位内；

(c)使所述样品与活性炭接触，其中所述活性炭结合待选择性地去除的蛋白；以及

(d)从所述样品去除所述活性炭，

由此从所述样品选择性地去除所述活性炭结合的蛋白。

2.一种增加包含靶蛋白和至少一种不期望的蛋白的样品中靶蛋白的纯度的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)提供包含所述靶蛋白和至少一种不期望的蛋白的样品；

(b)调整所述样品的溶液pH，使得所述pH在所述至少一种不期望的蛋白的等电点的2.0pH单位内；

(c)使所述样品与活性炭接触，其中所述活性炭结合所述至少一种不期望的蛋白；

(d)从所述样品去除所述活性炭，其中所述活性炭结合至所述至少一种不期望的蛋白；

由此增加所述样品中靶蛋白的纯度。

3.权利要求1的方法，其中所述pH在待选择性地去除的蛋白的等电点的1.0pH单位内。

4.权利要求2的方法，其中所述pH在所述至少一种不期望的蛋白的等电点的1.0pH单位内。

5.权利要求1的方法，其中选择性地去除的蛋白为蛋白杂质。

6.权利要求2的方法，其中所述至少一种不期望的蛋白为蛋白杂质。

7.权利要求2的方法，其中所述靶蛋白为免疫球蛋白。

8.权利要求7的方法，其中所述免疫球蛋白为单克隆抗体。

9.权利要求7的方法，其中所述免疫球蛋白为多克隆抗体。

10.权利要求1或2的方法，其中所述去除步骤包括过滤或离心。

11.权利要求2的方法，其中所述靶蛋白为重组蛋白。

12.权利要求2的方法，其中所述靶蛋白的纯度增加至少50％、或至少60％、或至少70％、或至少80％、或至少90％或更多。

13.权利要求1或2的方法，其中所述样品包含细胞培养进料。

14.权利要求13的方法，其中所述细胞培养进料为CHO细胞培养进料。

15.权利要求1或2的方法，其中所述样品包含在哺乳动物表达系统中表达的蛋白。

16.权利要求1或2的方法，其中所述样品包含在非哺乳动物表达系统中表达的蛋白。

17.权利要求1或2的方法，其中在所述调整步骤之前使所述样品进行澄清步骤。

18.权利要求17的方法，其中所述澄清步骤选自离心、沉降、深层或筛过滤、与絮凝剂配合以及pH改变。