[发明专利]一种多肽及其应用

权利要求书

1.一种与PSMA膜外区靶向性结合的多肽，所述多肽的氨基酸序列为SEQ ID NO:1。

2.根据权利要求1所述的与PSMA膜外区靶向性结合的多肽，其特征在于，所述多肽与PSMA胞外段，氨基酸44-750，靶向结合，并与偶联剂通过聚乙二醇PEG_n，n＝0,1,2,3连接，所述偶联剂介导多肽的放射性核素的标记。

3.根据权利要求2所述的与PSMA膜外区靶向性结合的多肽，其特征在于，所述偶联剂为DOTA、或NOTA、或CB-TE2A、或Hynic。

4.根据权利要求3所述的与PSMA膜外区靶向性结合的多肽，其特征在于，所述放射性核素为⁶⁸Ga，或¹¹¹In，或⁹⁰Y，或¹⁷⁷Lu，或⁶⁴Cu。

5.如权利要求1-4任一项所述的与PSMA膜外区靶向性结合的多肽在制备治疗或诊断前列腺癌的靶向性药物中的应用。

6.一种制备权利要求1-4任一项所述与PSMA膜外区靶向性结合的多肽的方法，包括以下步骤：①多肽从C端到N端方向合成，先在树脂上挂第一个氨基酸，称取2.0g树脂于洁净干燥的反应管中，加入适量二甲基甲酰胺DMF，活化30min左右，然后称取第一个氨基酸Fmoc-Leu(But)-OH 0.5mmol，4-二甲氨基吡啶DMAP 75mg，N,N'-二异丙基碳二亚胺DIC 1ml加入到反应管中，DMF做溶剂反应3h；反应完毕用DMF洗4～6次，加入适量吡啶和甲醇，体积比为1:1，反应30min；反应完毕用DMF洗4～6次；然后用哌啶溶液脱掉氨基酸的Fmoc，脱两次共15min，10min+5min。再用DMF洗4次，甲醇洗2次，取出少量树脂用茚三酮检测试剂检测，检测为蓝色，即可进行下一步反应；

②称取第二个氨基酸Fmoc--Phe-OH 1.5mmol，苯并三氮唑-N,N,N',N'-四甲基脲六氟磷酸酯HBTU 1.5mmol于反应管中，加入DIEA 0.5ml，反应40min，用DMF洗4～6次，取少量树脂用茚三酮检测试剂检测，显无色，然后加入哌啶溶液脱Fmoc，10min+5min，然后用DMF洗4次，甲醇洗两次，取出少量树脂用茚三酮检测试剂检测，检测为蓝色，即可进行下一步反应；

③以下氨基酸反应方法同②；

④称取0.75mmol偶联剂DOTA，HBTU 1.5mmol于反应管中，加入N,N-二异丙基乙胺DIEA 0.25ml，经过用茚三酮检测试剂检测，检测为无色；

⑤最后用三氟乙酸切割液切割2h，反应液抽滤，得多肽的三氟乙酸溶液，用乙醚沉淀，离心，然后再用乙醚洗3～5次，得白色固体，经HPLC纯化，冻干，得多肽DOTA-PSMAP。

7.将权利要求1中所述的多肽制备成放射性核素标记多肽的方法，配置权利要求1所述的DOTA-PSMAP多肽溶液为2mg/ml；HEPES为1M，PH为7；放射性核素溶液为1-10mCi/ml；

取25μl的HEPES液，分别依次加入0.7-5μl DOTA-PSMAP多肽溶液和100μl的放射性核素溶液，置于95℃的水浴锅中加热，反应15-30min即得到放射性核素-DOTA-PSMAP。

8.根据权利要求7所述的将权利要求1中所述的多肽制备成放射性核素标记多肽的方法，其特征在于，放射性核素溶液为⁶⁸GaCl₃，或⁶⁴CuCl₂，或¹¹¹InCl₃，或¹⁷⁷LuCl₃。