[发明专利]一种基于活性筛选的牡丹皮药材及制剂检测方法

权利要求书

1.一种基于活性筛选的牡丹皮药材及制剂检测方法，其特征在于检测指标成分是通过肾系膜细胞、血小板细胞膜固相色谱技术和糖基化产物反应体系筛选，结合聚类分析和主成分分析确定的，采用HPLC法，确定氧化芍药苷、芍药苷、三没食子酰葡萄糖、五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷和丹皮酚为检测指标，所述6个检测指标的含量HPLC法同步测定方法如下：

①液相色谱条件：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈(A)-0.1％甲酸水溶液(B)，梯度洗脱条件：0-20min，5％-10％A；20-30min，10％-10％A；30-80min，10％-18％A；80-120min，18％-50％A；检测波长254nm，流速0.8mL/min，柱温25℃；

②对照品溶液的制备：分别精密称取恒重的对照品氧化芍药苷、芍药苷、三没食子酰葡萄糖、五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷和丹皮酚适量，加60％甲醇溶液分别制成每1mL含芍药苷72.15μg、氧化芍药苷59.56μg、三没食子酰葡萄糖89.35μg、五没食子酰葡萄糖109.76μg、苯甲酰芍药苷137.67μg和丹皮酚86.23μg，用甲醇定容至刻度，摇匀；另各取1mL配成混合对照品溶液；

③供试品溶液的制备

牡丹皮药材供试品溶液的制备：精密称定牡丹皮药材粉末约0.5g，置50mL容量瓶中，加75％乙醇(v/v)20mL，超声或回流处理30min两次，取出，放冷，合并滤液，加75％乙醇定容至50mL刻度，摇匀，经0.45um的微孔滤膜滤过，即得；

牡丹皮提取物供试品溶液的制备：精密称定牡丹皮提取物0.1g，置50mL容量瓶中，加75％乙醇(v/v)20mL，超声或回流处理30min两次，取出，放冷，合并滤液，加75％乙醇定容至50mL刻度，摇匀，经0.45um的微孔滤膜滤过，即得；

牡丹皮制剂供试品溶液的制备：精密称定牡丹皮制剂粉末约0.25g，置50mL容量瓶中，加75％乙醇(v/v)20mL，超声或回流处理30min两次，取出，放冷，合并滤液，加75％乙醇定容至50mL刻度，摇匀，经0.45um的微孔滤膜滤过，即得；

④测定法：高效液相色谱仪分析对照品和供试品溶液，进样体积10μl。

2.根据权利要求2中所述的一种基于活性筛选的牡丹皮药材及制剂检测方法，其特征在于这6个成分具有对抗晚期糖基化产物AGEs诱导肾系膜细胞和血管内皮细胞的损伤作用，即提高肾系膜细胞和血管内皮细胞的SOD活性、降低MDA含量，以及降低系膜细胞FN蛋白表达和内皮细胞凋亡的影响。

3.根据权利要求1中所述的一种基于活性筛选的牡丹皮药材及制剂检测方法，其特征在于检测指标成分是组成结构比范围为：(1.3～1.5):(10.4～13.9):0.5:(2.7～3.5):(1.0～1.2):(14.9～16.1)。

4.根据权利要求1所述的一种基于活性筛选的牡丹皮药材及制剂检测方法，其特征在于：所述的含量同步测定方法中，牡丹皮药材、制剂中氧化芍药苷、芍药苷、三没食子酰葡萄糖、五没食子酰葡萄糖、苯甲酰芍药苷和丹皮酚与领近小峰的分离度应大于1.5。

5.根据权利要求1所述的一种基于活性筛选的牡丹皮药材及制剂检测方法，其特征在于用于牡丹皮药材、提取物、制剂的质量检测。

6.根据权利要求6所述的一种基于活性筛选的牡丹皮药材及制剂检测方法，其特征在于用于含牡丹皮的制剂包括颗粒剂、胶囊剂、酊剂、口服液、丸剂、膏剂、糖浆、片剂、外用剂型的制剂质量检测。