[发明专利]一种采用液相色谱法测定利伐沙班及其杂质的方法

说明书

本发明公开了一种测定利伐沙班及制剂中杂质的方法，该方法采用液相色谱法，以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱，以混合缓冲溶液为流动相A，乙腈为流动相B，流动相采用梯度洗脱方法，测定利伐沙班及其制剂的杂质。该方法可以将利伐沙班与已知杂质和未知杂质进行有效分离和测定，专属性强，准确度高，操作简便，能有效控制利伐沙班及其制剂的质量。

技术领域

本发明属于分析化学领域，具体涉及用液相色谱法测定利伐沙班及其制剂中杂质的方法。

背景技术

利伐沙班是一个高选择性直接抑制因子Xa的口服抗凝药，其分子式为C₁₉H₁₈ClN₃O₅S，其结构式见下式（a）化合物。

利伐沙班的化学名为：5-氯-N-({(5S)-2-氧代-3-[4-(3-氧代-4-吗啉基)-苯基]-1,3-噁唑烷-5-基}-甲基)-2-噻吩-甲酰胺。在合成利伐沙班的工艺中，一些已知结构的中间体和未知杂质因去除不完全而残留，影响利伐沙班的纯度和质量，这些已知结构的中间体和未知结构的杂质以及伐沙班的降解产物统称为药物质量控制中通常所说的有关物质（即杂质）。对于利伐沙班中需要控制的主要已知结构杂质有五个：起始原料SM1，其结构式见下式（b）化合物；杂质IP1（去氯利伐沙班，Dechlororivaroxaban），其结构式见下式（c）化合物(在Drug Metabolism and disposition,2009,Vol.37,No.5 P1046-1055中公开)；杂质IP2，其结构式见下式（d）化合物(WO2012035057中披露)；杂质IP3，其结构式见下式（e）化合物（US2009/36504中披露）；杂质IP4，其结构式见下式（f）化合物(WO2012035057中披露)。这些杂质均要进行控制，以保证利伐沙班质量。

CN103217492A公开一种利伐沙班光学异构体的分离测定方法。即取待测利伐沙班光学异构体样品和已知组成含量的利伐沙班消旋体标准样品适量，分别用乙腈溶解，配成待测利伐沙班光学异构体样品和已知组成含量的利伐沙班消旋体标准样品乙腈溶液，用键合型手性柱CHIRALPAKIC柱、进样，检测波长为210-260nm，柱温15-35℃，进样量5-20μl，控制流动相流速为0.7-1.0ml/min，完成待测利伐沙班光学异构体的分离；采用面积归一法将所得的利伐沙班光学异构体样品的分离图谱与已知组成的利伐沙班消旋体标准样品的分离图谱进行比对从而计算出待测的利伐沙班光学异构体中S构型和R构型的利伐沙班的含量。

CN103558326B公开了一种高效液相色谱法测定利伐沙班片中利伐沙班含量的方法，它包括如下步骤：对照品溶液的制备、供试品溶液的制备、测定，高效液相色谱仪的固定相为十八烷基硅烷键合硅胶，流动相为甲醇和0.01%磷酸的混合溶液，柱温为40～50℃，分别吸取对照品溶液与供试品溶液各10ul，注入液相色谱仪，读取数据。本发明应用高效液相色谱法测定利伐沙班片剂中利伐沙班含量，分离效率高、分析速度快、检测灵敏度高，通过检测利伐沙班片中利伐沙班的含量，能够控制利伐沙班片剂的质量，更好的控制产品的稳定性。

CN103822997A公开了一种利伐沙班中间体的分析检测方法，用于利伐沙班中间体的质量控制，是以十八烷基硅烷键合硅胶为填料的色谱柱（C18，4.6×150mm，5μm），以高氯酸水溶液和甲醇为流动相，梯度洗脱，以检测波长为240～250nm，柱温为30～40℃，流速0.7～1.1ml/min进行高效液相色谱法分析检测。本发明的分析检测方法可以有效的将利伐沙班中间体及其杂质分开，而且该方法具有分离度及灵敏度高，重复性及耐用性好，分析时间短，操作简单，结果稳定可靠的优点。