[发明专利]一种适用于玉米赤霉烯酮及其代谢物的在线测定方法

权利要求书

1. 一种适用于玉米赤霉烯酮及其代谢物的在线测定方法，其特征在于：利用毛细管电色谱技术，在有机-硅胶杂化毛细管整体柱上同时施加负电荷高压电场和液相泵辅助压力，在高压电场驱动和毛细管微流液相分配分离的双重作用下实现玉米赤霉烯酮及其代谢物的在柱富集和多组分连续分离，从而对玉米赤霉烯酮及其代谢物进行定量分析；

所述有机-硅胶杂化毛细管整体柱为十八烷基键合硅胶毛细管填充柱，或以乙烯基苄氯为功能单体、笼型八乙烯基倍半硅氧烷为交联剂组成的聚合物整体柱。

2. 根据权利要求1所述适用于玉米赤霉烯酮及其代谢物的在线测定方法，其特征在于：所述玉米赤霉烯酮及其代谢物包括玉米赤霉烯酮、α-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉烯醇、β-玉米赤霉醇、玉米赤霉酮。

3. 根据权利要求1所述适用于玉米赤霉烯酮及其代谢物的在线测定方法，其特征在于：应用十八烷基键合硅胶毛细管填充柱进行分析的具体条件包括：以体积比11：89的乙腈、水混合溶液配制样品，进样体积300 μL；以体积比83：17的甲醇、乙酸铵-氨水缓冲溶液的混合溶液为流动相，分离电压-15kV，液相泵辅助压力1000 psi，流速0.02 mL/min；

所述乙酸铵-氨水缓冲溶液的pH值为7.50，其中乙酸铵的浓度为1.00 mmol/L。

4. 根据权利要求1所述适用于玉米赤霉烯酮及其代谢物的在线测定方法，其特征在于：应用以乙烯基苄氯为功能单体、笼型八乙烯基倍半硅氧烷为交联剂组成的聚合物整体柱进行分析的具体条件包括：以体积比为11：89的乙腈、水混合溶液配制样品，进样体积300 μL；以体积比90：10的甲醇、乙酸铵-氨水缓冲溶液的混合溶液为流动相，分离电压-18kV，液相泵辅助压力1000 psi，流速0.02 mL/min。

5. 根据权利要求1或4所述适用于玉米赤霉烯酮及其代谢物的在线测定方法，其特征在于：所述以乙烯基苄氯为功能单体、笼型八乙烯基倍半硅氧烷为交联剂组成的聚合物整体柱的制备方法包括以下步骤：

1）将乙烯基苄氯、笼型八乙烯基倍半硅氧烷、引发剂和致孔剂混合配制成聚合反应溶液，在氮气气氛中于室温下超声处理15 min；

2）在室温下将超声处理后的聚合反应溶液均匀注入乙烯基衍生化处理的石英毛细管，密封，在60℃条件下加热反应12小时；

3）将二氯乙烷以0.25 L/min的流速冲洗步骤2）得到的聚合物整体柱2小时，然后以0.25 L/min的流速通入过滤的、三氯化铁饱和的二氯乙烷溶液2小时，再以冰水冷却1小时，在80℃条件下加热连续反应2小时，得到所述聚合物整体柱。

6. 根据权利要求5所述适用于玉米赤霉烯酮及其代谢物的在线测定方法，其特征在于：按质量百分数之和为100%计，步骤1）所述聚合反应溶液中各组分的质量百分数为：乙烯基苄氯24%，笼型八乙烯基倍半硅氧烷6%，引发剂1%，致孔剂69%；

所述引发剂为偶氮二异丁腈；

所述致孔剂为甲苯和十二醇的混合物，其中甲苯占致孔剂重量的35%。