[发明专利]一种干巴菌菌种的分离培养方法

说明书

技术领域

本发明属于菌种培养技术领域，具体涉及一种干巴菌菌种的分离培养方法。

背景技术

干巴菌（Thelephota.ganbajun.Zang）属担子菌亚门层菌纲非褶菌目革菌科革菌属的大型真菌，其子实体丛生，呈珊瑚状多次分枝。野生干巴菌是云南滇中特有的珍稀野生食用菌，属于与松树共生的外生菌根菌。科学研究记载，干巴菌干品含粗蛋白24.15%，粗纤维8.45%，总糖量3.1%，100g含维生素C1.10mg，维生素A16.0mg，B族维生素1.2mg，维生素E45.14 mg；含有18种氨基酸和人体必需的8种氨基酸，其比值为55%，是优质的蛋白质；干巴菌中含有的多种微量元素铁、钾、钠、磷、锌、镁、铜、锰、钙，特别是人体普遍缺乏的硒元素，其含量高达4603.59μg/100g，属于罕见的富硒珍贵野生菌；同时，干巴菌的香气挥发油有49种成分，量较大的是亚油酸甲酯；近年来，研究新发现在干巴菌中还含有高度抗氧化活性的对联三苯系列色素，而抗氧化物质能清除人体内的自由基，具有延缓衰老的功效。硒是联合国卫生组织确定的唯一的防癌抗癌元素，适量的硒几乎能防止一切癌变，并能防止人体的四十多种疾病。因此，干巴菌除了是美味野生菌外，其更具有保健和膳食补充价值。近十年来，人们试图用人工栽培技术培育干巴菌，但除了一些试验性报导外，至今仍未实现人工化栽培。本发明的目的就是解决在野生干巴菌资源日趋稀缺现状下，利用人工培育的干巴菌菌种的干巴菌菌丝及扩繁技术，将有效的增加野外干巴菌菌丝数量并保护野生干巴菌的资源。 

        由于野生干巴菌是云南特有的珍稀野生食用菌，尤以生长在滇中的云南松森林里面的味道最佳，由于属于外生菌根菌，很难实现人工栽培，虽然目前存在一些人工栽培的方法，均存在成活率低、不能保证菌种栽培繁殖的稳定性等等问题，因此，开发一种能解决上述技术问题的干巴菌分离培养方法是非常必要的。

发明内容

本发明的目的在于提供一种干巴菌菌种的分离培养方法。

本发明的目的是这样实现的，包括采样、表面灭菌、分离及纯培养步骤，具体包括：

A、采样：在云南松林地中选择生长4~7天以内的干巴菌子实体进行采样并进行保藏；

B、表面灭菌：将采集的干巴菌子实体进行表面灭菌处理；

C、分离及纯培养：从灭菌处理后的干巴菌子实体掰开，切取0.1~0.2cm的干巴菌子实体置入由马铃薯150~250g、葡萄糖10~30g、琼脂20~30g、蛋白胨5~7g、松树皮和/或松毛40~60g、磷酸二氢钾2~4g、硫酸镁4~6g制备得到的干巴菌组织分离培养基的培养基平面或试管斜面中，于20~26℃下避光培养36~72h，再接种至由棉籽壳或荞籽40~70g、松木屑和/或松毛30~50g、麸皮0~15g、石膏粉0.5~1.5g制备得到的干巴菌固体培养基的培养基平面或试管斜面中，于20~26℃下避光培养6~8天得到目标物，移入干巴菌固体培养基的试管斜面保存。

本发明是选用野生干巴菌的幼嫩子实体活体，在云南松生长干巴菌的林地现场采集，迅速组织分离，用松树皮、松木屑、松毛等针叶林废弃物做培养基质培养得到，得到的干巴菌菌种繁殖稳定性好、成活率达99.9%以上且长势良好。

附图说明

图1为本发明实施例1制备得到的干巴菌长势示意图；

图2为本发明实施例2制备得到的干巴菌长势示意图；

图3为本发明实施例3制备得到的干巴菌长势示意图。

具体实施方式

下面结合附图对本发明作进一步的说明，但不以任何方式对本发明加以限制，基于本发明教导所作的任何变换或替换，均属于本发明的保护范围。

本发明所述干巴菌菌种的分离培养方法，包括采样、表面灭菌、分离及纯培养步骤，具体包括：

A、采样：在云南松林地中选择生长4~7天以内的干巴菌子实体进行采样并进行保藏；

B、表面灭菌：将采集的干巴菌子实体进行表面灭菌处理；