[发明专利]一种含真菌α-淀粉酶的退浆复合酶及其制备方法

权利要求书

1.一种含真菌α-淀粉酶的退浆复合酶，由以下重量组分的原料制备：真菌α-淀粉酶40-60份，霉菌培养物20-30份，麦芽提取物15-25份，脂肪酶3-10份，非离子表面活性剂2-8份、激活剂2-6份，保护剂1-3份，抗氧化剂0.3-0.5份；

所述真菌α-淀粉酶和霉菌培养物是由里氏木霉(Trichoderma reesei)CCTCC NO:M2013602经液体深层发酵而制备；

所述激活剂是由如下质量组份的无机盐均匀混合而成：氯化钙60-80份，氯化钠30-50份，氯化锌10-15份，氯化镁5-10份；

所述保护剂由以下重量份数的原料组成:灵芝多糖15-25份，海藻糖15-25份，(NH₄)₂SO₄6-10份，半胱氨酸2-4份。

2.如权利要求1所述的含真菌α-淀粉酶的退浆复合酶，其特征在于，所述真菌α-淀粉酶的制备方法包括以下步骤：保存完好的里氏木霉CCTCC NO:M 2013602的菌种经斜面菌种活化、一级、二级、三级液体种子扩大培养至种子罐，将种子罐液体种子以6％接种量接入发酵罐培养基，培养温度27-30℃，搅拌速度120-180r/m，通风量1-3vvm,培养时间10-15h；然后以1-2℃/h降温速率缓慢降温至10-15℃，搅拌速度250-300r/m，通风量1-2vvm,恒温培养15-20h；继续以1-2℃/h降温速率缓慢降温至2-5℃，此时，将种子罐液体种子以4％接种量追加接入发酵罐，恒温培养20-30h；最后以1-2℃/h升温速率缓慢升温至10-15℃，搅拌速度200-400r/m，通风量1-2vvm,恒温培养15-20h；继续以1-2℃/h升温速率缓慢升温至27-30℃，恒温培养15-20h；发酵液经过滤、浓缩、调配、精滤、干燥得固体真菌α-淀粉酶。

3.如权利要求1所述的含真菌α-淀粉酶的退浆复合酶，其特征在于，所述霉菌培养物活菌含量为7x10¹⁰-9x10¹⁰CFU/g。

4.如权利要求1所述的含真菌α-淀粉酶的退浆复合酶，其特征在于，所述麦芽提取物的制备方法为：将大麦芽和小麦芽按质量比6-8:3-5均匀混合，粉碎至粒度0.5-1mm,得粉碎麦芽；加入粉碎麦芽质量1-3倍的水，用乳酸调节pH值为3-4，在功率150-300W、频率2000Hz条件下进行微波提取，其中，每次微波辐照总时间60-80s,进行间隔式辐照：辐照10s，间隔10s，控制温度20-35℃，如此辐照10次，同时在功率200-300W,频率30-40KHz条件下进行超声波辅助提取；保温1-3h,然后，在功率200-400W、频率2000Hz条件下进行微波提取，其中，每次微波辐照总时间90-105s,进行间隔式辐照：辐照15s，间隔10s，控制温度40-60℃，如此辐照10次，同时在功率300-500W,频率40-50KHz条件下进行超声波辅助提取；55-65℃保温30-60min；最后自然降温至室温，于电场强度25-35kV/cm，脉冲时间400-600μs,脉冲频率200-300Hz条件下进行高压脉冲电场提取15-20min；提取液过滤得第一滤液，加滤渣2倍的水漂洗、过滤得第二滤液，将第一滤液和第二滤液按质量比1:1-2均匀混合，混合液超滤浓缩、冷冻干燥、低温粉碎即得麦芽提取物。

5.如权利要求1所述的含真菌α-淀粉酶的退浆复合酶，其特征在于，所述非离子表面活性剂的质量组份为：烷基多苷25-35份，烷基葡萄糖酰胺15-25份，N-十二烷基乙二胺三乙酸钠8-12份，异构醇醚羧酸盐AEC-11078-12份，月桂酰胺醚羧酸盐5-8份，平平加c-1253-5份，JFC 3-5份。

6.如权利要求1所述的含真菌α-淀粉酶的退浆复合酶，其特征在于，所述抗氧化剂为葡萄籽原花青素、迷迭香提取物和杏叶提取物中的任意一种或几种组合。

7.一种制备如权利要求1所述含真菌α-淀粉酶的退浆复合酶的方法，其特征在于，包括如下步骤：首先将所述保护剂、激活剂分别超微粉碎，均匀混合，随后立即依次加入麦芽提取物、霉菌培养物均匀混合20-30min，然后依次加入真菌α-淀粉酶、脂肪酶、非离子表面活性剂均匀混合，最后加入抗氧化剂，混合均匀后密封包装即得退浆复合酶。