[发明专利]结肠癌诊断试剂、试剂盒

说明书

技术领域

本发明属于肿瘤分子生物学技术领域，具体涉及一种结肠癌诊断试剂、试剂盒。

背景技术

结肠癌是指结肠粘膜上皮在外界环境或自身遗传因素等多种诱因下发生的恶性病变，是全世界发病率处于第三位的常见恶性肿瘤。当结肠癌细胞发生转移或扩散以后，患者五年生存率小于百分之十^[1]。抑癌基因和原癌基因的突变是导致上皮细胞发生癌变的重要因素之一：已经有报道证明RAS和BRAF激酶的突变导致结肠癌细胞获得更强的侵袭能力^[2]，而抑癌基因APC的突变则导致转录调节因子β-catenin大量积累在细胞核，最终诱导细胞发生EMT^[3]。不过，结肠癌细胞具体如何影响正常结肠上皮细胞，它们在肿瘤微环境中的相互作用方式以及如何整体调控生物个体癌变过程的机制尚不清楚。

目前结肠癌的治疗仍以根治性手术为主，但因结肠癌转移后的化疗效果差，术后约有20-40％的患者出现复发。因此，结肠癌的早期筛查与早期诊断对于结肠癌的防治非常重要，并且发展有效监控结肠癌的复发转移试剂、试剂盒以及研发新的结肠癌靶向治疗药物是急需解决的重要课题和国民健康的重大需求。

斯钙素蛋白2，即Stanniocalcin-2(STC-2)是一个33kD，由302个氨基酸组成的蛋白。近年来，STC2发现与许多肿瘤的发展进程密切相关，在很多病理学研究中被认为是肿瘤的分子标志物。与正常胃粘膜组织相比，胃癌组织中STC2的表达量明显升高，同时具有淋巴结转移和侵入血管能力的肿瘤细胞，STC2的表达量最高^[4]。在乳腺癌发展过程中，STC2作为维甲酸信号通路的靶标而被激活^[5]。在结肠癌中，STC2是潜在的肿瘤预后标志物，STC2高表达常常与肿瘤淋巴转移、淋巴结侵袭和患者生存率较低相关^[6]。而在肾癌组织中发现，STC2在RNA和蛋白水平均显著增高导致患者生存率很低。正常肾脏组织中，STC2主要表达于远曲小管和肾小球，在肾癌中则主要表达于肾癌细胞质和肾癌细胞膜^[3]。综合以上研究结果发现，STC2与多种癌症的发展过程相关，是很好的肿瘤诊断及治疗的分子标志物。但是对于STC2具体如何调节肿瘤开关，及其所涉及到的信号通路研究却仍然不多。虽然Law等人报道了STC2可以通过激活ERK信号通路来诱导细胞发生上皮间质转化过程(EMT)^[1]，但是对于该通路中其他重要节点分子具体如何变化，以及是否存在其他信号通路与ERK信号通路一起调控细胞发生EMT并未做深入研究。我们之前利用SILAC蛋白定量技术发现，在模拟的肿瘤微环境系统中，STC2的分泌量会发生改变。这个结果说明STC2参与了肿瘤发展进程，在上皮细胞与肿瘤细胞相互影响的过程中扮演了重要角色。到目前为止，未见STC2和结肠癌关系的报道。未见通过检测STC2表达水平及分泌水平来实现结肠癌的诊断试剂及试剂盒的相关报道，也未见通过降低其表达水平来达到治疗结肠癌的目的的报道。

本领域目前需要提供新的结肠癌的诊断尤其是转移诊断、药物疗效监测的检测产品以及防治药物。

发明内容

本发明的目的是为结肠癌的诊断提供一种新选择。

本发明的技术方案是结肠癌诊断试剂，包括检测斯钙素蛋白2的试剂。

进一步的，所述的检测斯钙素蛋白2的试剂包括斯钙素蛋白2的多克隆抗体或单克隆抗体。

本发明还提供了结肠癌诊断试剂盒，包括检测斯钙素蛋白2的试剂。

进一步的，所述的检测斯钙素蛋白2的试剂包括斯钙素蛋白2的多克隆抗体或单克隆抗体。

本发明还提供了治疗结肠癌的药物，主要活性成分为斯钙素蛋白2表达抑制剂。

具体的，所述的抑制剂为斯钙素蛋白2拮抗剂、斯钙素蛋白2多克隆抗体或斯钙素蛋白2单克隆抗体。

具体的，所述的抑制剂为斯钙素蛋白2的shRNA分子或者shRNA质粒。

此外，本发明提供了斯钙素蛋白2的多克隆抗体、单克隆抗体、shRNA质粒或shRNA分子在制备结肠癌诊断试剂中的用途。本发明也提供了斯钙素蛋白2的多克隆抗体、单克隆抗体、shRNA质粒或shRNA分子在制备预防和治疗结肠癌的药物中的用途。

其中，上述多克隆抗体可为Santa Cruz Biotechnology,INC.(Santa Cruz公司，)的货号为sc-14352的多克隆抗体。上述的STC2shRNA质粒可为Santa Cruz公司的货号为sc-44127-SH的shRNA质粒。