[发明专利]酶的固定化载体及其制备方法与应用在审
| 申请号: | 201410652131.8 | 申请日: | 2014-11-14 |
| 公开(公告)号: | CN104450667A | 公开(公告)日: | 2015-03-25 |
| 发明(设计)人: | 王乐;武大鹏;惠明;刘娜 | 申请(专利权)人: | 河南工业大学 |
| 主分类号: | C12N11/14 | 分类号: | C12N11/14 |
| 代理公司: | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人: | 董芙蓉 |
| 地址: | 450000 河*** | 国省代码: | 河南;41 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 固定 载体 及其 制备 方法 应用 | ||
1.一种酶的固定化载体,其特征在于,所述固定化载体是直径长度为0.8~3cm成球碳纤维,其中,所述成球碳纤维的球团高径比为H/D=0.6/1~1/0.6。
2.根据权利要求1所述的酶的固定化载体,其特征在于,所述成球碳纤维的球团高径比为H/D=1/0.8。
3.一种如权利要求1或2所述酶的固定化载体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:
(1)预处理:将碳纤维切成长度为0.3cm~0.8cm短切碳纤维放入有机溶剂中浸泡3~5h,过滤或离心回收上清液,用相当于3~5倍碳纤维体积的水对短切碳纤维进行清洗,然后将清洗后的短切碳纤维浸泡于体积大于3倍碳纤维体积的沸水浴中处理3~5h后,用水清洗后,烘干,取出备用;
(2)成球:将经步骤(1)中预处理的短切碳纤维,以投入量为2.0~20g/L投入含水溶液的容器中,然后放置于摇床中,控制摇床转速为120rpm~220rpm,摇动0.5~4h,即得酶的固定化载体。
4.根据权利要求3所述的酶的固定化载体的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,将碳纤维切成长度为0.4~0.6cm短切碳纤维放入丙酮中浸泡4h,过滤或离心回收上清液,用相当于5倍碳纤维体积的蒸馏水对短切碳纤维进行清洗,然后将清洗后的短切碳纤维浸泡于体积6倍为碳纤维体积的沸水浴中处理4h后,用蒸馏水清洗后,烘干,取出备用。
5.根据权利要求3或4所述的酶的固定化载体的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,将经步骤(1)中预处理的短切碳纤维,以等量方式每隔0.5~5.0分钟投入一次,共投放3~5次。
6.根据权利要求3或4所述的酶的固定化载体的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述短切碳纤维投入量为2.5~15g/L;在250mL摇瓶中,所述含水溶液的量相当于10~50倍短切碳纤维体积。
7.根据权利要求3~6之一所述的酶的固定化载体的制备方法,其特征在于,所述含水溶液选自自无菌水、无菌含水种子培养基、无菌含水含菌种培养液中的任一种;所述碳纤维选自2k碳纤维、3k碳纤维、6k碳纤维、24k碳纤维、补强布中的任一种。
8.根据权利要求7所述的酶的固定化载体的制备方法,其特征在于,所述含水溶液选自无菌水;所述碳纤维选自6k碳纤维。
9.根据权利要求1或2所述的酶的固定化载体在制备固定化酶中的应用,其特征在于,将所述固定化载体加入到相应缓冲液配制的相应酶溶液中,室温下搅拌反应,于2~6℃静置过夜,洗去游离酶,即得固定化酶。
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