[发明专利]酶的固定化载体及其制备方法与应用在审

专利信息
申请号: 201410652131.8 申请日: 2014-11-14
公开(公告)号: CN104450667A 公开(公告)日: 2015-03-25
发明(设计)人: 王乐;武大鹏;惠明;刘娜 申请(专利权)人: 河南工业大学
主分类号: C12N11/14 分类号: C12N11/14
代理公司: 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 代理人: 董芙蓉
地址: 450000 河*** 国省代码: 河南;41
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摘要:
搜索关键词: 固定 载体 及其 制备 方法 应用
【权利要求书】:

1.一种酶的固定化载体,其特征在于,所述固定化载体是直径长度为0.8~3cm成球碳纤维,其中,所述成球碳纤维的球团高径比为H/D=0.6/1~1/0.6。

2.根据权利要求1所述的酶的固定化载体,其特征在于,所述成球碳纤维的球团高径比为H/D=1/0.8。

3.一种如权利要求1或2所述酶的固定化载体的制备方法,其特征在于,包括以下步骤:

(1)预处理:将碳纤维切成长度为0.3cm~0.8cm短切碳纤维放入有机溶剂中浸泡3~5h,过滤或离心回收上清液,用相当于3~5倍碳纤维体积的水对短切碳纤维进行清洗,然后将清洗后的短切碳纤维浸泡于体积大于3倍碳纤维体积的沸水浴中处理3~5h后,用水清洗后,烘干,取出备用;

(2)成球:将经步骤(1)中预处理的短切碳纤维,以投入量为2.0~20g/L投入含水溶液的容器中,然后放置于摇床中,控制摇床转速为120rpm~220rpm,摇动0.5~4h,即得酶的固定化载体。

4.根据权利要求3所述的酶的固定化载体的制备方法,其特征在于,步骤(1)中,将碳纤维切成长度为0.4~0.6cm短切碳纤维放入丙酮中浸泡4h,过滤或离心回收上清液,用相当于5倍碳纤维体积的蒸馏水对短切碳纤维进行清洗,然后将清洗后的短切碳纤维浸泡于体积6倍为碳纤维体积的沸水浴中处理4h后,用蒸馏水清洗后,烘干,取出备用。

5.根据权利要求3或4所述的酶的固定化载体的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,将经步骤(1)中预处理的短切碳纤维,以等量方式每隔0.5~5.0分钟投入一次,共投放3~5次。

6.根据权利要求3或4所述的酶的固定化载体的制备方法,其特征在于,步骤(2)中,所述短切碳纤维投入量为2.5~15g/L;在250mL摇瓶中,所述含水溶液的量相当于10~50倍短切碳纤维体积。

7.根据权利要求3~6之一所述的酶的固定化载体的制备方法,其特征在于,所述含水溶液选自自无菌水、无菌含水种子培养基、无菌含水含菌种培养液中的任一种;所述碳纤维选自2k碳纤维、3k碳纤维、6k碳纤维、24k碳纤维、补强布中的任一种。

8.根据权利要求7所述的酶的固定化载体的制备方法,其特征在于,所述含水溶液选自无菌水;所述碳纤维选自6k碳纤维。

9.根据权利要求1或2所述的酶的固定化载体在制备固定化酶中的应用,其特征在于,将所述固定化载体加入到相应缓冲液配制的相应酶溶液中,室温下搅拌反应,于2~6℃静置过夜,洗去游离酶,即得固定化酶。

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