[发明专利]一种RGD修饰的超小型超顺磁氧化铁纳米颗粒的制备方法

权利要求书

1.一种RGD修饰的超小型超顺磁氧化铁纳米颗粒的制备方法，包括：

(1)将三价铁盐溶解于超纯水中，氮气鼓吹后加入亚硫酸钠溶液，反应30～40分钟；然后依次加入超支化聚乙烯亚胺PEI水溶液和NH₃·H₂O，60～70℃下恒温搅拌反应30～40分钟；然后在室温下反应1.5～3小时；反应结束后，将产物磁分离洗涤纯化，即得PEI包裹的超小型超顺磁氧化铁纳米颗粒USPIO/PEI.NH₂；

(2)将步骤(1)中制备的USPIO/PEI.NH₂纳米颗粒用DMSO洗涤后，重新分散于DMSO中；再将DMSO溶解的FI加入到USPIO/PEI.NH₂的DMSO溶液中，搅拌反应1～2天，磁分离洗涤并分散于水中，得到USPIO/PEI.NH₂-FI纳米颗粒；

(3)将6-(马来酰亚胺基)己酸琥珀酰亚胺酯6-M与COOH-PEG-NH₂混合于DMSO溶液中，搅拌反应10～12小时，得到COOH-PEG-6-M；然后再将充分溶解于DMSO中的端基为巯基的RGD SH-RGD逐滴加入到COOH-PEG-6-M的DMSO溶液中，搅拌反应1～2天，透析，真空冷冻干燥，即得到COOH-PEG-RGD；

(4)将步骤(3)中制备的COOH-PEG-RGD与EDC、NHS混合溶解于DMSO后，搅拌活化2～4h；将步骤(2)中制备的USPIO/PEI.NH₂-FI纳米颗粒用DMSO洗涤后，重新分散于DMSO中，然后加入活化的COOH-PEG-RGD溶液，搅拌反应2～4天，磁分离洗涤并分散于水中，得到USPIO/PEI.NH₂-FI-PEG-RGD纳米颗粒；

(5)向步骤(4)中制备的USPIO/PEI.NH₂-FI-PEG-RGD纳米颗粒水溶液中加入三乙胺，并搅拌20～40分钟；然后加入乙酸酐，继续搅拌反应20～30小时，磁分离洗涤并分散于超纯水中，即得最终产物USPIO/PEI.NHAc-FI-PEG-RGD。

2.根据权利要求1所述的一种RGD修饰的超小型超顺磁氧化铁纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的三价铁盐为FeCl₃·6H₂O；三价铁盐、超纯水、NH₃·H₂O的配比为1.2～1.4g:20～25mL:2～3mL，三价盐、亚硫酸钠、超支化聚乙烯亚胺PEI的质量比为1.2～1.4:0.20～0.25:0.50～0.53。

3.根据权利要求1所述的一种RGD修饰的超小型超顺磁氧化铁纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的NH₃·H₂O质量百分比浓度为25～28％。

4.根据权利要求1所述的一种RGD修饰的超小型超顺磁氧化铁纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述步骤(1)中的超支聚乙化烯亚胺PEI的分子量为25000。

5.根据权利要求1所述的一种RGD修饰的超小型超顺磁氧化铁纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述步骤(2)中FI与USPIO/PEI.NH₂表面氨基的摩尔比为1:39～40。

6.根据权利要求1所述的一种RGD修饰的超小型超顺磁氧化铁纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中RGD:6-M:NH₂-PEG-COOH的摩尔比为1:1～1.2:1～1.2；

NH₂-PEG-COOH的分子量为2000。

7.根据权利要求1所述的一种RGD修饰的超小型超顺磁氧化铁纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述步骤(3)中透析为用截留分子量1000的透析袋透析2-4天。

8.根据权利要求1所述的一种RGD修饰的超小型超顺磁氧化铁纳米颗粒的制备方法，其特征在于，所述步骤(4)中的COOH-PEG-RGD与EDC、NHS的摩尔比为1:8～10:8～10。