[发明专利]一种甲状腺过氧化物酶抗体磁微粒化学发光免疫定量检测试剂盒

权利要求书

1.一种甲状腺过氧化物酶抗体磁微粒化学发光免疫定量检测试剂盒，其特征在于，所述试剂盒包括： 

1)TPO-Ab校准品，浓度为0，10，25，100，200，500IU/mL； 

2)TPO-Ab样本稀释液； 

3)偶联有链霉亲和素的磁微粒悬浮液； 

4)生物素标记的TPO-Ab抗原； 

5)鼠抗人酶标结合物，所用的酶为辣根过氧化物酶，辣根过氧化物酶纯度RZ≥3.0，活性≥250U/mL； 

6)TPO-Ab质控品；质控品包括浓度18IU/mL的低值质控品和350IU/mL的高值质控品； 

7)化学发光液A液和B液；A液为5mmol/L，pH8.6的Tris-HCl缓冲液，且该缓冲液中含有终浓度0.7g/L鲁米诺和终浓度0.165g/L对碘酚；B液为0.675g/L过氧化脲； 

8)20倍浓缩洗液； 

9)反应管。 

2.根据权利要求1所述的TPO-Ab磁微粒化学发光免疫定量检测试剂盒，其特征在于，所述的磁微粒是表面包裹带有氨基或羧基活性基团的四氧化三铁，粒径10-50nm。 

3.根据权利要求1所述的TPO-Ab磁微粒化学发光免疫定量检测试剂盒，其特征在于，所述的反应管的材料是透明聚苯乙烯、聚乙烯、聚丙烯或玻璃。 

4.根据权利要求1所述的TPO-Ab样本稀释液，是含溴甲酚紫的Tris盐酸缓冲液。 

5.一种制备所述权利要求1-4任一权利要求所述的试剂盒的方法，其特征在于，包括以下步骤： 

(1)TPO-Ab校准品的配制： 

将TPO-Ab用校准品稀释液配置成校准品浓储液，所述校准品稀释液是用含1％BSA的磷酸盐缓冲液配制而成，以企业校准品进行定标，将浓储液用校准品稀释液稀释至工作浓度，分别为0，10，25，100，200，500IU/mL； 

(2)TPO-Ab质控品的配制： 

用校准品稀释液将上述浓储液稀释至18IU/mL和350IU/mL，18IU/mL为低值质控，350IU/mL为高值质控； 

(3)生物素标记的TPO-Ab的制备 

取0.5mg TPO-Ab抗原，用硼酸盐缓冲液在2～8℃下透析1～3h；将透析后的抗原加 入45ug生物素，同时加入二甲基亚砜，使二甲基亚砜最终浓度为5-10％，缓慢振荡，避光反应3h；在上述溶液中加入300uL1M氯化铵溶液，常温避光反应2h；用0.01M PBS溶液在2～8℃下透析24h，期间换液2-4次； 

(4)鼠抗人酶结合物的制备 

采用改良高碘酸钠氧化法将鼠抗人抗体与辣根过氧化物酶进行偶联后，用酶稀释液将其稀释至工作浓度1:5000，并加入8％酶稳定剂，储存于2～8℃； 

(5)20倍浓缩洗液的配制 

20倍浓缩洗液包括58g/L磷酸氢二钠，5.92g/L磷酸二氢钠，180g/L NaCl，10mL/L Tween-20和2％Proclin300； 

(6)化学发光液A液和B液的配制 

A液为0.7g/L鲁米诺，0.165g/L对碘酚，缓冲液为pH8.6的5mmol/L Tris-HCl，避光保存；B液为0.675g/L过氧化脲，用工艺用水配制； 

(7)组装：将上述试剂组装成盒，储存于2～8℃，每种试剂各一瓶； 

(8)对采用该方法制备的试剂盒进行物理检查，对准确度、剂量-反应曲线的线性、精密度、特异性、灵敏度、质控品的测定值和稳定性进行测定。