[发明专利]一种蔬菜用有机肥料及其制备方法

权利要求书

1.一种蔬菜用有机肥料的制备方法，其特征在于，包含以下步骤：

(1)以质量份数计，将质量含量为5-8％的棕榈树精华溶液200份、质量含量为5-8％的竹子精华溶液290份、竹子干细胞50份混合后，加入适量蒸馏水并搅拌均匀，35-40℃下发酵7-8天；

(2)在步骤(1)得到发酵混合物中再次混合质量含量为5-8％的莫兰或印茄精华溶液100份以及莫兰或印茄干细胞30份，加入适量蒸馏水并搅拌均匀，35-45℃下发酵7-9天；

(3)将质量含量为5-8％的布袋莲或浮萍精华溶液180份以及布袋莲或浮萍干细胞30份加入步骤(2)得到的混合物中，再次加入适量蒸馏水并搅拌均匀，35-40℃下发酵8-9天；

(4)将质量含量为5-8％的攀藤寄生植物精华100份以及攀藤寄生植物干细胞20份加入步骤(3)得到的混合物中，再次加入适量蒸馏水并搅拌均匀，30-35℃下发酵6-8天；

(5)将步骤(4)制得的发酵产物经15000转/分的离心分离机旋转分离两小时，随后30-35℃下发酵6-8天，产物即所述蔬菜用有机肥料。

2.如权利要求1所述的一种蔬菜用有机肥料的制备方法，其特征在于：所述竹子干细胞的提取方法包括如下步骤：

(1)提取竹子干细胞：选择生长状况良好的竹子的树干、枝干，用无菌蒸馏水冲洗10分钟，洗净后，将竹子的树干、枝干首先切割成长度10-20厘米的小块，然后将整理后的竹子原料放入在搅拌设备中粉碎成细末；

(2)将步骤(1)中粉碎制得的竹子细末原料，放入多个盛有固态培养基的培养器皿中，在受控暗室内培养，培养温度25±1度；

(3)形成层细胞的诱导：在整个培养过程中保持25±1摄氏度的恒温，培养器皿外空间湿度保持在86±1左右，培养20-30天后，竹子内部组织的细胞系增量放大，形成层细胞系与韧皮组织分离，细胞系组织有大量的液泡存在，并且接触后易碎；

(4)将步骤(3)中形成层细胞群体用接种铲轻轻将其移入盛有液态培养基的培养器皿中，在暗室中，用旋转摇床，以100rpm、25±1度下培养，培养时间设定为20天，使液态培养基中的干细胞充分生长，在生长期内始终保持极高的活力；

(5)竹子干细胞的提取：首先，将培养液细胞系通过分子质量截留值4万的中空纤维超滤柱进行超滤，然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌3小时，再进行经旋转式真空蒸发器，间接加热80度进行旋转吸空蒸发，浓缩至小于原体液5分之1时取出，在放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥，30小时后，在含水分小于3％以下时取出，粉碎100目，装袋收藏备用。

3.如权利要求1所述的一种蔬菜用有机肥料的制备方法，其特征在于：所述莫兰或印茄干细胞的提取方法包括如下步骤：

(1)提取莫兰或印茄树木枝干的干细胞：选择生长状况良好的莫兰或印茄的树干，用无菌蒸馏水冲洗10分钟，洗净后，将其切割成边长小于20厘米的方块，然后将所述方块放入在搅拌设备中粉碎成细末；

(2)将步骤(1)中粉碎制得的树干细末原料，放入多个盛有固态培养基的培养器皿中，在受控暗室内培养，培养温度25±1度；

(3)形成层细胞的诱导：在整个培养过程中保持35±1度的恒温，培养器皿外空间湿度保持在90±1左右，培养15-25天后，树干内部组织的细胞系增量放大，形成层细胞系与韧皮组织分离，细胞系组织有大量的液泡存在，并且接触后易碎；

(4)将形成层细胞群体用接种铲轻轻将其移入盛有液态培养基的培养器皿中，在暗室中，用旋转摇床，以100rpm、35±1度下培养，培养时间设定为16天，使液态培养基中的干细胞充分生长，在生长期内始终保持极高的活力；

(5)莫兰或印茄干细胞的提取：首先，将培养液细胞系通过分子质量截留值4万的中空纤维超滤柱进行超滤，然后将过滤后的全部细胞混合液经另一容器内快速搅拌3小时，再进行经旋转式真空蒸发器，间接加热80度进行旋转吸空蒸发，浓缩至小于原体液5分之1时取出，再放入真空冷冻干燥机内真空冷冻干燥，25-30小时后，在含水分小于3％以下时取出，粉碎100目，装袋收藏备用。