[发明专利]一株油菜内生菌解淀粉芽孢杆菌4‑3及其应用方法

说明书

技术领域：

本发明涉及一株油菜内生细菌解淀粉芽孢杆菌4-3及其应用。

背景技术：

油菜是我国主要的油料作物，油菜菌核病(Sclerotinia sclerotiorum)是油菜生产中的三大病害之一，在我国南方油菜产区发病尤其严重，发病率一般在10％～30％,严重的高达80％以上,造成巨大经济损失(邱业先，汪金莲，王卫芳等.油菜菌核病抗性诱导菌的筛选[J].江西农业大学学报,1996,12(18):395-398.)。在长江中下游及东南沿海主要油菜产区，包括江苏、安徽、上海、浙江、湖南、湖北、江西等地发生尤为突出，严重影响了我国的油菜生产。目前，在生产上以选择抗病品种和化学药剂进行防治，但存在抗病品种资源缺乏和化学药剂污染农产品和环境等问题，而生物防治具有对环境污染小，成本低，作用持久等优点越来越受到人们的重视。

内生菌(endophyte)是指那些在其生活史的一定阶段或全部阶段生活于健康植物的各种组织和器官内部对植物组织不引起明显病害症状的微生物。已发现的内生细菌对宿主植物的有益作用有固氮作用、促进植物生长、抗逆境、抗动物摄食、抗病原真菌和细菌等(邹文欣，谭仁祥.植物内生细菌研究新进展[J].植物学报，2001，43(9)：881—892.)。据报道，现已从棉花、水稻、马铃薯和辣椒等多种植物中分离筛选到对植物病害具有生防作用的内生细菌(江木兰，赵瑞，胡小加，等.油菜内生生防菌BY-2在油菜体内的定殖与对油菜菌核病的防治作用[J].植物病理学报，2007，37(2):192-196.)。张献芳等从油菜和水稻植株上分离到内生细菌后，分别用利福平和硫酸链霉素标记目标菌株，再以浸种，灌根和接种无菌苗3种方法接种油菜后，均可以在油菜体内分离到被标记的菌株(张献芳，文凯，逯晋忠，等.2株内生细菌在油菜体内的定殖、促生长及抗虫性检测[J].华中农业大学学报，2011，4(30):143-147.)。

陈英化等报道了从棉花健株茎内分离筛选到一株棉花黄萎病内生拮抗细菌L-4-2为解淀粉芽孢杆菌，用100mg·L^-1利福平诱导菌株后，能在棉花的根、茎中分离到该菌株。(陈英化，李爱霞，冯丽娜等.棉花黄萎病内生拮抗细菌L-4-2的鉴定及定殖[J].西北农业学报，2012，21(2)：68-71)。张荣胜等报道了菌株Lx11为解淀粉芽孢杆菌，盆栽试验结果表明Lx11对水稻细菌性条斑病菌的防效达62.5％，大面积示范试验结果表明菌株Lx11对水稻细菌性条斑病菌的田间防效达60.2％，显著高于化学药剂20％叶枯唑的防效(51.2％和45.8％)，(张荣胜，刘永锋，陈志谊.水稻细菌性条斑病菌拮抗细菌的筛选、评价与应用研究[J].中国生物防治学报，2011，27(4)：510-514)。

发明内容：

本发明的目的在于提供一株油菜内生细菌及其在拮抗核盘病菌和促进无机磷、有机磷和不溶性钾的吸收上的应用，以提高油菜拮抗菌核病的能力和促进油菜对无机磷、有机磷和不溶性钾的吸收。

解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)4-3，保藏编号为CCTCC NO:M 2014320。

培养所述的解淀粉芽孢杆菌4-3的培养基，其特征在于，

培养基配方：甘露醇1.8g、胰蛋白胨1.6g、NaCl 0.4g、MgSO₄·7H₂O 0.3g、KH₂PO₄0.4g、1％MnSO₄ 0.2ml、1％FeC₆H₅O₇ 0.5ml、1％Na₂MoO₄·2H₂O 0.4ml、去离子水100ml、pH7.2。

所述的解淀粉芽孢杆菌4-3的应用方法，用于拮抗核盘病菌。尤其是用于拮抗引起油菜菌核病的核盘病菌。

所述的解淀粉芽孢杆菌4-3的应用方法，用于降解无机磷、有机磷和解钾。

所述的无机磷包括磷酸三钙。

所述的有机磷包括卵磷脂。

所述的钾包括钾长石粉。

所述的解淀粉芽孢杆菌4-3的应用方法，用于发酵制作油菜增产的菌肥。

用于所述的解淀粉芽孢杆菌4-3发酵的培养基，淀粉2.0g、黄豆粉1.0g、甘露醇0.1g、蛋白胨0.2g、NaCl 0.2g、MgSO₄·7H₂O 0.05g、水100ml、pH7.2。