[发明专利]一种从紫花苜蓿茎中制备多糖及糖蛋白的方法

说明书

技术领域

本发明涉及从紫花苜蓿茎中制备纯多糖及糖蛋白的方法。

背景技术

苜蓿多糖(Alfalfa Polysaccharides，AP)是从多年生豆科牧草紫花苜蓿(Medicago sativa L.)中提取的一种天然无毒的植物多糖，其生物活性目前已被大量研究并证实。已有研究表明苜蓿多糖具有增强免疫力、抗衰老以及抑制癌细胞增殖等保健作用，并具有很好的抗HIV功效，还具有抗氧化、治疗高胆固醇的作用。此外，苜蓿多糖也具有降血糖、降血脂等功能。近年来苜蓿多糖因其保健作用和在禽畜饲料添加剂方面的应用而逐渐受到人们的重视。

紫花苜蓿不仅是我国也是全世界人工种植面积最大的草种，每年可收获3-4茬，年平均产量为16-20吨/公顷(因产地和品种而不同)，来源广泛，廉价易得。近年来，随着农业产业结构的调整和畜牧业的发展，以及对生态系统的重视，苜蓿种植面积逐年扩大，并逐步向规模化、集约化方向发展，成为推动农村经济可持续发展与增加农民收入的新增长点。然而，目前我国的苜蓿产品仍以草捆、草块、草颗粒、草粉等初级产品为主，技术含量较低，经济效益也较微薄。因此，为保证我国苜蓿产业的健康、高效、持续发展，苜蓿多糖等深加工产品的研究已经成为迫在眉睫的问题。

苜蓿叶蛋白的研究已经很多，而苜蓿茎中则含有大量的多糖类物质。目前苜蓿多糖的提取和纯化方法多样，没有统一的标准，传统方法所得苜蓿多糖主要是水提多糖，经加热或超声所得，不仅耗时耗能，而且产率低，所得多糖种类单一。而根据其他植物多糖及真菌多糖的研究表明，植物中除水溶性多糖外，还含有大量的碱溶性多糖及糖蛋白类成分。因此，为了合理开发苜蓿资源，使苜蓿多糖的制备和纯化能达到规模化、工业化的需求，其提取工艺有待改善。

发明内容

本发明的目的在于提供一种从紫花苜蓿茎中制备纯多糖及糖蛋白的方法。

本发明的第一方面，提供一种从紫花苜蓿茎中制备纯多糖及糖蛋白的方法，所述方法包括以下步骤：

(a)采用85vol％-100vol％乙醇水溶液加热处理紫花苜蓿茎粉，脱酯并除去小分子组分，过滤收集第一残渣；

(b)采用水加热处理步骤(a)得到的第一残渣，过滤分别收集第一滤液和第二残渣；

(c1)将步骤(b)收集得到的第一滤液浓缩后，加入85vol％-100vol％乙醇水溶液，沉淀得到水溶性粗多糖；

(c2)将浓度为0.5M-2.5M的NaOH溶液加入到步骤(b)收集得到的第二残渣搅拌提取，过滤分别收集第二滤液和第三残渣；

(d1)加入85vol％-100vol％乙醇水溶液到步骤(c2)获得的第二滤液中，过滤分别收集第一上清液和沉淀物冷碱可溶性粗多糖，将第一上清液浓缩后调节至酸性，分离得到第二上清液和沉淀物第一糖蛋白粗组分，将第二上清液调节至中性，超滤脱盐得到第二糖蛋白粗组分；

(d2)采用浓度为0.5M-2.5M的NaOH溶液加热处理步骤(c2)获得的第三残渣，过滤收集第三滤液和第四残渣，加入85vol％-100vol％乙醇水溶液到第三滤液，过滤收集沉淀物热碱可溶性粗多糖。

在另一优选例中，步骤(c1)和步骤(c2)可以同时进行、完成步骤(c1)后进行步骤(c2)、或完成步骤(c2)后进行步骤(c1)。

在另一优选例中，步骤(d1)和步骤(d2)可以同时进行、完成步骤(d1)后进行步骤(d2)、或完成步骤(d2)后进行步骤(d1)。

在另一优选例中，所述方法在步骤(a)前还包括对紫花苜蓿茎进行干燥、粉碎、过筛获得所述紫花苜蓿茎粉的步骤。

在另一优选例中，所述紫花苜蓿茎粉的含水量至多为10wt％，较佳地，在5wt％以内，更佳地，在1wt％以内，甚至≤0.1wt％。

在另一优选例中，所述过筛是指过20-100目筛，较佳地过30-50目筛。

在另一优选例中，步骤(a)中，所述紫花苜蓿茎粉与所述乙醇水溶液的料液比为1g：5-25mL，较佳地为1g：5-20mL，更佳为1g：10-20mL。

在另一优选例中，步骤(a)中，加热温度为50-85℃，较佳地为60-75℃，加热时间为0.5-5h，较佳地为45min-2h。

在另一优选例中，所述步骤(a)中，所述紫花苜蓿茎粉与所述乙醇水溶液的料液比为1g：8-20mL，较佳地为1g：8-15mL。