[发明专利]一种厚皮香悬浮细胞再生植株的快速繁殖方法

权利要求书

1. 一种厚皮香悬浮细胞再生植株的快速繁殖方法，包括叶片的消毒、愈伤组织的诱导、愈伤组织的分化、生根培养、炼苗移栽，其主要步骤如下：

（1）取厚皮香的叶片，对其进行灭菌处理；

（2）将步骤（1）灭菌处理过的厚皮香叶片接入培养基配方为White+NAA0.25mg/L+6-BA2.5mg/l+2，4-D3.0mg/L+聚乙烯砒咯烷酮（PVP）诱导培养基中进行愈伤组织诱导培养，附加蔗糖30g/L，琼脂5.5g/L，PH5.8，光照1000lx，光期6h，暗期18h；

（3）取步骤（2）诱导出来的愈伤组织放入液体培养基White（硝酸铵含量减半）+2.0mg/Lpiclorram进行悬浮细胞培养，附加蔗糖30g/L，PH5.8，光照1000lx，光期12h，暗期12h；

（4）取步骤（3）培养出来的愈伤组织放入分化培养基White+NAA0.08mg/L+6-BA0.8mg/l+CH400-500mg/L，附加蔗糖50g/L，PH5.8，光照2000lx，光期14h，暗期10h；

（5）步骤（4）分化后接入生根培养基White（硝酸铵含量减半）+IBA0.01-0.1mg/L中，附加蔗糖20g/L，PH5.8，光照5000lx，光期16h，暗期8h。

2. 按照权利要求1所述的一种厚皮香悬浮细胞再生植株的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（1）中所述厚皮香无菌叶片的获得为，取厚皮香的叶片，在0.1%抑菌型洗洁精中浸泡5min，流水冲洗10min，超净工作台上2.5%次氯酸钠处理6min，无菌水冲洗5遍。

3. 按照权利要求1所述的一种厚皮香悬浮细胞再生植株的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（2）诱导培养基加入了抗氧化剂聚乙烯砒咯烷酮（PVP），可以防止愈伤组织的褐化。

4. 按照权利要求1所述的一种厚皮香悬浮细胞再生植株的快速繁殖方法，其特征在于：步骤（4）分化培养基中附加了CH，能促进愈伤组织的褐化。