[发明专利]叶酸修饰的普朗尼克P85共聚物的制备及其在5‑氟尿嘧啶纳米药物中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及药物应用技术领域，具体地说，是关于叶酸修饰的普朗尼克P85共聚物（P85-FA）的制备，本发明还涉及5-氟尿嘧啶抗癌纳米药物的制备，特别是在抗结直肠癌肝转移中的用途。

背景技术

结直肠癌是常见的恶性肿瘤之一，可发生在结直肠的任何部位，其发病率在全球范围内呈逐年上升趋势，已成为导致患者死亡的三大癌症之一。结直肠癌转移多发生在肝脏，据报道30-40%的患者在疾病的早期就伴有肝转移；而在疾病晚期，95%的患者都出现肝转移，并且结直肠癌患者的死亡原因多为肝部转移灶的发展。目前虽有以手术治疗为主的多种治疗方案，可提高结直肠癌的治愈率，但对结直肠癌肝转移的患者并没有更有效的治疗方法。

普朗尼克（Pluronic）是由聚氧乙烯－聚氧丙稀－聚氧乙烯（PEO-PPO-PEO）形成的两性分子纳米共聚物。具有合适组成比和相对分子质量的普朗尼克在水溶液中能自发形成胶束，其直径通常为 10-100 纳米。普朗尼克可以与抗肿瘤药物形成共聚物胶束，其胶束中心由疏水的 PPO 组成，可结合药物、DNA或蛋白等分子；亲水的 PEO 链组成胶束外壳，从而提高药物的靶向性和稳定性。近年来研究发现，药物-普朗尼克共聚物胶束本身具有很强的稳定性，可以显著增加肿瘤对药物的敏感性，减小药物的毒副反应，如普朗尼克P85 PEO26-PPO40-PEO26)可以与化疗药物阿霉素形成共聚物胶束 P85-DOX，与单独使用阿霉素药物组相比，可以显著抑制人白血病细胞株 P388 细胞中耐药蛋白 Pgp 的表达，诱导ATP 衰竭，增加肿瘤细胞对化疗药物的敏感性。单独使用有效剂量的普朗尼克 P85 对细胞没有毒副作用，具有较高的生物安全性。普朗尼克 L61、F127、P123 及 F88 对增强化疗药物敏感性方面的作用显著低于 P85。

5-氟尿嘧啶（5-fluorouracil，5-Fu）是结直肠癌首选的化疗药物，然而5-Fu严重的骨髓抑制及胃肠道毒副反应，很大程度上限制了其在临床的广泛应用。近年，学者们开展了许多对5-Fu新剂型的研究工作，但均未解决增强靶向性及减轻毒副作用的问题。目前与5-FU联合用药的化疗方案仍然是结肠癌的一线治疗方案。临床使用时，需要提前给予叶酸(folic acid，FA)类制剂，以增强5-FU的作用，降低5-FU的毒副反应，临床使用较为不便。叶酸是人体必需的小分子维生素，其对于细胞所必须的核苷酸的生物合成以及维持一碳单位的正常代谢通路起重要作用。叶酸对叶酸受体( folate receptor，FR)表现出极高的亲和力。FR表达水平与上皮源性肿瘤组织的恶性程度及转移侵袭力存在正相关关系。叶酸修饰的聚合胶束对叶酸受体过表达的结肠癌细胞具有强亲和力，能有效地将所载药物导入肿瘤细胞。

因此，本发明人将叶酸与纳米载体通过化学连接方式连接，方法简单，不易引起免疫反应，能显著增加5-FU的抗肿瘤作用，降低其毒副反应，临床操作更为简便，具有非常好的抗肿瘤药物开发前景。

发明内容

本发明的目的是针对现有治疗措施中的不足，提供一种叶酸修饰的普朗尼克P85的共聚物及其在5-氟尿嘧啶抗肿瘤纳米药物的制备方法，特别是结直肠癌肝转移中的应用。

本发明首先提供了一类叶酸修饰的普朗尼克P85的共聚物，结构为

式中，n=1-8。优选地，n=2-4。更优选地，n=2，结构见附图1。

本发明其次提供了上述的叶酸修饰的普朗尼克P85共聚物的制备方法，合成步骤如下式：

包括以下步骤：

（1）氮气保护下，普朗尼克P85在乙腈中与CDI室温搅拌，反应得到P85-CDI；

（2）P85-CDI 溶于乙腈中，慢慢滴加到H₂N(CH₂)_nNH₂中，室温搅拌反应得到P85-NH₂；

（3）P85-NH₂与叶酸、缩合剂溶解于DMSO中，溶液中加入三乙胺，在氮气保护下室温搅拌反应，合成含有末端叶酸修饰的普朗尼克P85共聚物。

优选地，上述的共聚物的制备方法，在第（3）步使用的缩合剂为N-羟基丁二酰亚胺(NHS)和N,N’-二环己基碳二亚胺。

本发明还提供了一种抗肿瘤组合物，包含上述的叶酸修饰的普朗尼克P85共聚物、安全有效量的临床上常用的抗肿瘤化合物和药学上接受的载体。优选地，所述的临床上常用的抗肿瘤化合物为5-氟尿嘧啶。