[发明专利]牛胆盐及制备方法和制备的牛胆盐在干粉细菌培养基生产中的应用

说明书

技术领域

本发明涉及一种牛胆盐的制备方法，具体地说是一种从牛胆膏（汁）中制备牛胆盐及制备方法，特别是涉及一种可用于干粉细菌培养基原料的牛胆盐及制备方法和制备的牛胆盐在干粉细菌培养基生产中的应用。

背景技术

干粉细菌培养基在药品、食品、水质、化妆品、进出口商品和医学临床中用于检测细菌。牛胆盐是干粉细菌培养基中一种必需和十分重要的原料。随着干粉细菌培养基应用量的不断增加，对牛胆盐的需求也在不断增加。但是，我国牛胆盐产品质量一直没有过关，目前，只能从英、美等国进口。

中国农业出版社1995出版，陈天寿主编的《微生物培养基的制造与应用》（P120～124页）介绍了多种胆盐的生产方法。

如方法一：牛胆汁干燥成块→乙醇溶解胆块→过滤去杂质→上清液分馏回收乙醇→剩下的膏状物用乙醚去脂→回收乙醚后干燥产品→粉碎→成品。

如方法二：牛胆膏（汁）→加碱水解→脱脂→酸化→洗涤烘干→溶解→脱色→过滤→成盐→蒸馏去乙醇→烘干→粉碎→成品。等等。

以上方法存在工艺时间长，且脱脂处理不彻底，生产的牛胆盐在用于生产干粉细菌培养基时，出现加入2﹪的蛋白胨煮沸时溶液不澄明清亮，特别是在121℃高压15分钟后溶液混浊，甚至有上浮物出现。

发明内容

本发明的目的是提供一种可用于干粉细菌培养基原料的牛胆盐及制备方法和制备的牛胆盐在干粉细菌培养基生产中的应用。

本发明是采用如下技术方案实现其发明目的的，

一种牛胆盐，外观为白色或淡黄色粉末，胆酸含量＞55﹪，干燥失重＜5﹪，灰分＜19﹪，酸价＜145；对大肠菌有较强的抑制作用，菌落＜2㎜，对沙门氏菌和痢疾志贺氏菌无抑制作用，菌落＞1.5㎜。

一种上述牛胆盐的制备方法，它包括下列步骤：

⑴皂化：以重量计，按1：4.0～5.0：0.5～0.6比例取牛胆膏、水和含量＞96﹪的氢氧化钠加入反应釜中皂化，反应温度105℃～110℃，反应时间20小时～24小时；

为避免加入的氢氧化钠的量太多，浓度太高时，破坏牛胆膏中的胆酸，本发明在步骤⑴中，首先加入65﹪～75﹪的氢氧化钠，氢氧化钠先溶于水中成为氢氧化钠溶液；其余的氢氧化钠另外溶于水中，皂化时分批加入，以补充皂化反应时消耗的碱和保持溶液的总体积，直至使牛胆膏彻底皂化。

⑵氧化：待皂化液冷却至室温，调pH值8.0～8.5，往反应釜中加入浓度为8﹪～10﹪的双氧水，直至使皂化液的颜色由棕黑色变成棕黄色；

⑶酸化：往反应釜中加入浓度为18﹪～22﹪的硫酸或盐酸，边加边搅，直至pH值2.5～3.0；煮沸，使溶液表面浮出颗粒状粗酸；

⑷脱脂：待溶液冷却至室温，取出颗粒状粗酸离心甩干后，移入反应釜中，加入颗粒状粗酸重量1.2倍～1.5倍的溶剂脱脂剂，加热到20℃～35℃，搅拌15分钟～20分钟，放出，再离心甩干；

为尽量去除颗粒状粗酸中的脂类物质，本发明所述步骤⑷重复1～3次。

本发明在步骤⑷中，所述溶剂脱脂剂为6号溶剂油或乙醚或120号溶剂油。

⑸      洗涤：对步骤⑷脱脂后的颗粒状粗酸用浓度为95﹪的酒精在40℃搅拌洗涤，取出离心甩干；

⑹钡化：以重量计，按1：0.18～0.2：5～6比例取洗涤后的颗粒状粗酸、氯化钡和浓度为75﹪的酒精加入反应釜中，所述氯化钡先溶于2倍～3倍的水中；加氢氧化钠溶液，调pH值为7.8，加温80℃～90℃，回流4小时，放出冷却沉淀，取上清液在反应釜中分馏；

⑺去钡离子：首先，按步骤⑹分馏后的固体物重加4倍～5倍水，加碳酸钠调pH 值13～14，煮沸2小时～4小时，分离去沉淀，取上清液；然后，对上清液加入硫酸调pH值7.2～7.4，蒸发水分至粘稠状；

⑻活性炭脱色：首先，按步骤⑺所得粘稠状物重加5倍～6倍量浓度为95﹪的酒精，加温至全部溶解，冷却，过滤，取液体在反应釜中分馏；然后，以重量计，按1：0.05～0.06：5～6比例取分馏后的固体物、活性炭和浓度为75﹪～80﹪的酒精，不加温搅拌褪色1小时～2小时，放出沉淀，过滤去活性炭；最后，取液体在反应釜中分馏，回收酒精，剩余固体物干燥、粉碎得牛胆盐；

为尽量析出粘稠状物中已溶于浓度为95﹪的酒精中的无机盐（硫酸钠），本发明在步骤⑻中，所述冷却为将溶液置于0℃～4℃下冷藏5小时～6小时。