[发明专利]携带CAS9的重组腺病毒及其应用有效
| 申请号： | 201410400098.X | 申请日： | 2014-08-14 |
| 公开（公告）号： | CN104178461B | 公开（公告）日： | 2017-02-01 |
| 发明（设计）人： | 张普民;程然然;彭瑾;闫永红;卞广兴 | 申请（专利权）人： | 北京蛋白质组研究中心 |
| 主分类号： | C12N7/01 | 分类号： | C12N7/01;C12N15/861 |
| 代理公司： | 北京纪凯知识产权代理有限公司11245 | 代理人： | 关畅,何叶喧 |
| 地址： | 102206 北京市昌平区科学园路33号*** | 国省代码： | 北京;11 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 携带 cas9 重组 病毒 及其 应用 | ||
1.携带Cas9蛋白的编码基因的重组腺病毒；所述Cas9蛋白如序列表的序列7所示。
2.如权利要求1所述的重组腺病毒，其特征在于：所述Cas9蛋白的编码基因如序列表的序列6自5’末端第789-5045位核苷酸所示。
3.如权利要求1或所述的重组腺病毒，其特征在于：其制备方法包括如下步骤：
(1)将所述Cas9蛋白的编码基因插入pDONRTM221载体的attL1和attL2位点之间，得到中间质粒；
(2)将中间质粒与pAD-DEST载体发生gateway反应，得到含有所述CAS9蛋白的编码基因的重组质粒，即为重组质粒pAD-DEST-CAS9；
(3)将重组质粒pAD-DEST-CAS9导入哺乳动物细胞并培养，得到所述重组腺病毒。
4.如权利要求3所述的重组腺病毒，其特征在于：所述哺乳动物细胞为293细胞。
5.一种重组质粒，其制备方法如下：
(1)将所述Cas9蛋白的编码基因插入pDONRTM221载体的attL1和attL2位点之间，得到中间质粒；
(2)将中间质粒与pAD-DEST载体发生gateway反应，得到含有所述CAS9蛋白的编码基因的重组质粒。
6.权利要求1至4中任一所述的重组腺病毒在制备用于敲除目的基因的试剂盒中的应用。
7.一种用于敲除目的基因的试剂盒，包括权利要求1至4中任一所述的重组腺病毒。
8.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括携带所述目的基因的sgRNA的编码基因的重组慢病毒。
9.如权利要求7所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括携带所述目的基因的sgRNA的编码基因的重组质粒。
10.如权利要求7或8所述的试剂盒，其特征在于：所述目的基因为CCAAT增强子结合蛋白-A。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于北京蛋白质组研究中心，未经北京蛋白质组研究中心许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201410400098.X/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
