[发明专利]一种治疗糖尿病视网膜病变的中药组合物的质量检测方法

说明书

技术领域

本发明属于药学和分析化学领域，具体涉及一种治疗糖尿病视网膜病变的中药组合物的质量检测方法。

背景技术

糖尿病视网膜病变(Diabetic Retinopathy，简称DR)，是糖尿病严重而常见的眼部并发症之一。随着糖尿病病程的延长，DR的发生率亦随之增高。病程8年以上者中，糖尿病视网膜病变发生率约为50％。该病早期症状不明显，易被忽视，晚期又没有特效的控制方法，疾病缠绵，顽固难治。本病失治，后果严重，是导致成人失明的主要原因，致盲率高达8-12％，对患病人群的生活质量造成了严重不良影响。因此，DR的防治已成为当今医学领域急需解决的重大攻关课题，日益受到国内外医学界和医药工作者的高度重视。

在申请人早前的一件名为“一种治疗早期糖尿病视网膜病变的中药制剂”专利中(专利号ZL200610087540.3，授权公告日2009年9月16日)，公开了一种治疗早期糖尿病视网膜病变的中药制剂，处方组成为：

黄芪30-60g、女贞子9-15g、益母草9-30g、乌梅3-10g、黄连2-9g、肉桂2-5g、密蒙花3-9g。

本方组方特别，临床效果显著。但是，迄今未见有关其质量检测方法的报道。为了保证用药质量和安全，有必要建立上述原料药制备成的中药组合物的质量检测方法。

由于该处方中药味较多，且中药成分复杂，单一的定性鉴别或含量测定，都难以全面反映所述中药组合物的质量。因此，通过多次试验尝试，本发明最终选择了采用HPLC的方法，分别以黄芪甲苷、盐酸小檗碱、蒙花苷为检测指标，对方中的黄芪、黄连、密蒙花进行含量测定；同时采用TLC的方法，对方中的所有原料药——黄芪、女贞子、益母草、乌梅、黄连、密蒙花、肉桂进行薄层鉴别，以含量测定和薄层鉴别相结合的方式同时对所述中药组合物进行质量控制。

发明内容

针对上述问题，本发明的一个目的在于提供一种治疗糖尿病视网膜病变的中药组合物的质量检测方法。该方法操作简便、准确、可靠、重现性好，可有效地控制所述中药组合物的内在质量，保证制剂的稳定性和临床疗效。

为了实现上述发明目的，本发明采用了如下的技术方案：

一种治疗糖尿病视网膜病变的中药组合物的质量检测方法，所述中药组合物的原料药组成为：

黄芪30-60重量份、女贞子9-15重量份、益母草9-30重量份、乌梅3-10重量份、黄连2-9重量份、肉桂1-5重量份、密蒙花3-9重量份；

所述质量检测方法包括含量测定和薄层鉴别。

优选的，本发明所述质量检测方法，所述含量测定包括黄芪甲苷的含量测定，具体操作为：

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为35∶65的乙腈-水为流动相；蒸发光散射检测器检测；理论板数按黄芪甲苷峰计算应不低于4000；

对照品溶液的制备：取黄芪甲苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含0.3mg的溶液，即得；

供试品溶液的制备：取所述中药组合物粉末约4g，精密称定，加入70％乙醇100ml，称定重量，超声20min，放冷，再称定重量，用70％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过；精密量取续滤液50ml，蒸干，残渣加水25ml使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次，每次25ml，合并正丁醇提取液，用氨试液洗涤3次，每次40ml，正丁醇液回收溶剂至干，残渣加甲醇使溶解并转移至5ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得；

测定法：分别精密吸取对照品溶液10μl、20μl，供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定，用外标两点法对数方程计算，即得；

本发明所述中药组合物含黄芪甲苷不得少于0.5mg/g。

优选的，本发明所述质量检测方法，所述含量测定还包括蒙花苷和小檗碱的含量测定，其中采用如下的前处理方法，得到供试品溶液分别用于蒙花苷和小檗碱的含量测定：

取所述中药组合物粉末约0.6g，精密称定，置具塞锥形瓶，精密加入50％乙醇50ml，称定重量，超声处理20min，放冷，再称定重量，用50％乙醇补足减失的重量，摇匀，滤过，即得。

优选的，上述蒙花苷的含量测定，还包括：

色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以体积比为45∶54.5∶0.5的甲醇-水-醋酸为流动相；检测波长为326nm；理论板数按蒙花苷峰计算应不低于1000；

对照品溶液的制备：取蒙花苷对照品适量，精密称定，加甲醇制成每1ml含蒙花苷0.1mg的溶液，即得；