[发明专利]一种从桔柚果皮中提取纯化橙皮苷的方法

权利要求书

1.一种从桔柚果皮中提取纯化橙皮苷的方法，其特征在于：包括：

1)桔柚果皮取白皮层，剪碎，置55℃～65℃烘干，粉碎成桔柚果皮粗粉；取该桔柚果皮粗粉按料液比1:20～35(w/v)加入0.05～0.3％NaOH-60～70％乙醇溶液，40℃～75℃超声提取1～3次，每次25～50min；合并提取液并浓缩至原体积的0.35～0.65倍；调节pH值至4.5～5.5，置于2～6℃下静置过夜待沉淀析出；取沉淀，减压干燥沉淀，得到橙皮苷粗提物；

2)取经预处理的大孔树脂滤去水分后装柱，按大孔树脂与橙皮苷粗提物1:1.2～1.6(v/w)的比例称取橙皮苷粗提物，加水溶解制成0.17～0.18mg/ml的上样液后上样；用水洗脱1～2.5BV以洗去杂质；再用40～55％乙醇洗脱4～6BV；收集洗脱液并浓缩至2～8ml，置于2～6℃下冷藏至白色沉淀析出；取沉淀，减压干燥沉淀，得到橙皮苷。

2.根据权利要求1所述的一种从桔柚果皮中提取纯化橙皮苷的方法，其特征在于：所述步骤1)中，桔柚果皮取白皮层，剪碎，置55℃～65℃烘干，粉碎成粒径为18～25目的桔柚果皮粗粉；取该桔柚果皮粗粉按料液比1:29～31(w/v)加入0.09～0.11％NaOH-64～66％乙醇溶液，68～72℃超声提取2次，每次28～32min；合并提取液并浓缩至原体积的0.45～0.55倍；调节pH值至4.5～5.5，置于2～6℃下静置过夜待沉淀析出；取沉淀，减压干燥沉淀，得到橙皮苷粗提物。

3.根据权利要求1所述的一种从桔柚果皮中提取纯化橙皮苷的方法，其特征在于：所述步骤2)中，取经预处理的大孔树脂滤去水分后装柱，按大孔树脂与橙皮苷粗提物1:1.3～1.5(v/w)的比例称取橙皮苷粗提物，加水溶解制成0.171～0.172mg/ml的上样液后上样；用水洗脱1.8～2.2BV以洗去杂质；再用48～52％乙醇洗脱4.8～5.2BV；收集洗脱液并浓缩至4～6ml，置于2～6 ℃下冷藏至白色沉淀析出；取沉淀，减压干燥沉淀，得到橙皮苷。

4.根据权利要求1所述的一种从桔柚果皮中提取纯化橙皮苷的方法，其特征在于：所述减压干燥沉淀步骤为：将沉淀在40～50℃，-0.1～-0.08MPa下减压干燥。

5.根据权利要求1所述的一种从桔柚果皮中提取纯化橙皮苷的方法，其特征在于：所述步骤2)中，大孔树脂装柱之径高比为1:8～10。

6.根据权利要求1所述的一种从桔柚果皮中提取纯化橙皮苷的方法，其特征在于：所述步骤2)中，上样流速为0.5ml/min；洗脱流速为0.5ml/min。

7.根据权利要求1所述的一种从桔柚果皮中提取纯化橙皮苷的方法，其特征在于：所述大孔树脂为D101、AB-8中的一种。

8.根据权利要求1所述的一种从桔柚果皮中提取纯化橙皮苷的方法，其特征在于：还包括：

3)测定步骤1)所得之橙皮苷粗提物纯度：通过高效液相色谱法测定：

色谱条件：色谱柱：lichrocart C18；流动相：25:75～20:80(v/v)的乙腈-0.1％磷酸水溶液；流速：0.8～1.2mL/min；检测波长283nm；柱温24～26℃；理论板数按橙皮苷峰计算不低于2000。

9.根据权利要求1所述的一种从桔柚果皮中提取纯化橙皮苷的方法，其特征在于：还包括：

4)测定步骤2)所得之橙皮苷纯度：通过高效液相色谱法测定：

色谱条件：色谱柱：lichrocart C18；流动相：25:75～20:80(v/v)乙腈-0.1％磷酸水溶液；流速：0.8～1.2mL/min；检测波长283nm；柱温24～26℃；理论板数按橙皮苷峰计算不低于2000。