[发明专利]一种消旋体茶氨酸的制备方法

说明书

技术领域

本发明属于氨基酸消旋技术领域，具体是涉及一种化学方法消旋茶氨酸，并用HPLC法检测茶氨酸消旋体纯度和手性。

背景技术

茶氨酸(L-theanine)是茶叶特征性非蛋白氨基酸，具有减肥降血压，抗肿瘤，保护神经，缓解疲劳，改善睡眠，提高免疫力等生理功效，是公认为安全的物质，也是天然药物、天然保健品、功能型饮料等领域最具开发潜力的物质。其结构式为：

手性分子与人体内的酶、受体、离子通道等生物大分子作用，表现出错综复杂的对映体选择性，因此不同构型的手性分子在体内的药理作用、代谢过程及毒性也存在着显著的差异。在手性药物未被人们认识以前，欧洲一些医生曾给孕妇服用没有经过拆分的消旋体药物作为镇痛药或止咳药，很多孕妇服用后，生出了无头或缺腿的先天畸形儿，有的胎儿没有胳膊、手。仅仅4年时间，世界范围内诞生了1.2万多名畸形的“海豹婴儿”。这就是被称为“反应停”的惨剧。后来经过研究发现，反应停的R对映体有镇静作用，但是S-对映体对胚胎有很强的致畸作用。

茶氨酸也有DL两种构型。自然存在的茶氨酸均为L型，合成类茶氨酸多为D型和L型的混合物。两种构型生物学活性存在着差异，D－茶氨酸在机体内代谢生物活性较低，L－茶氨酸生物活性较高。有人对这两种异构体在动物体内的代谢特点进行了比较研究，结果表明，给SD大鼠口服相同剂量的这两种茶氨酸后，30、60和120min时血浆中L-型的浓度是D-型的3倍多，L-茶氨酸的吸收明显比D-茶氨酸快。如果同时口服这两种构型的复合物，则L-型在血浆中的浓度明显高于D-构型；如果静脉给药，则D-茶氨酸和L-茶氨酸在血浆中的浓度没有明显差别。现在观点认为，D-型茶氨酸会和L-茶氨酸进行竞争性抑制，D-型茶氨酸存在不利于L-茶氨酸的吸收。因此有必要，研究一种方法，来测定合成茶氨酸产品的DL的分布情况，以便于消除或消减D-型含量，提高产品质量、生物学功效、降低毒性。

天然的茶氨酸均为L型，纯品也可以从阿拉丁等试剂公司获取。而D茶氨酸标样很难获取。且目前没有文献对上述测定DL分布情况的方法的相关研究，用时，也没有制备D型纯品的相关报道，导致对茶氨酸的研究工作受到了巨大的阻碍。

发明内容

本发明提供了一种消旋体茶氨酸的制备方法，该方法在有机酸的环境下，用水杨醛做催化剂，水浴加热，得到旋光度为0消旋体茶氨酸。

本研究以纯品L茶氨酸为原料，利用一定反应条件，消旋L-茶氨酸的，获得了旋光度为0消旋体茶氨酸。一般认为，旋光体通过消旋，在旋光度为0时，被认为是DL两种构型各占50％。

一种消旋体茶氨酸的制备方法，包括：将茶氨酸溶解于有机酸中，加入醛，水浴加热，反应完成，后处理得到消旋体茶氨酸。

所述的茶氨酸可选用DL两种构型混合物，也可选择L-茶氨酸纯品，作为优选，所述的茶氨酸为L-茶氨酸。

作为优选，所述的有机酸为冰醋酸，所述的醛为水杨醛。采用水杨醛作为催化剂能够保证反应终了后产品的旋光度为0，避免消旋不足(L型大于D型的含量)或者过消旋(L型小于D型的含量)。

作为优选，所述的L-茶氨酸在冰醋酸的浓度为0.05g/ml，采用该技术方案时，即能保证L-茶氨酸完全溶解，又能保证尽可能高的L-茶氨酸浓度，有利于提高实验效率。

作为优选，所述的L-茶氨酸和水杨醛的摩尔比为：L-茶氨酸：水杨醛＝1：1～5％。水杨醛添加量太少时反应变慢，消旋的结果不易控制，甚至旋光度出现负数，即过度消旋，同时旋光浮动大；水杨醛添加量太大时，一是没有进一步改善消旋度，而且分离的时候增加杂质含量，增加了后处理难度。

作为优选，所述的水浴加热的温度为80℃到90℃；温度太高不利于席夫碱(Schiff base)的形成，而且过高温度消旋效果不好，温度低，反应慢而且消旋效果不理想。

作为进一步优选，所述的水浴加热的时间为40～80分钟。且反应过程中采用每10分钟检测一次旋光度，直至检测到反应体系的旋光度为0，反应完成。

作为优选，所述的后处理操作为：将反应液进行旋转蒸发，用乙醇洗涤，过滤抽干，得到消旋体茶氨酸固体。

作为优选，本发明采用HPLC测定产品纯度和手性纯度；所述的产品纯度是指，在采用普通色谱柱、普通的流动相时，检测的产品的纯度，主要目的在于检测产品中的其他非异构体杂质；所述的手性纯度是采用相应的手性流动相检测时的产品纯度，目的在于检测产品中光学异构体的相对含量；