[发明专利]一种那屈肝素钙的制备方法

说明书

技术领域

本发明涉及医药合成领域，具体涉及一种那屈肝素钙的制备方法。

背景技术

肝素是一种糖胺聚糖，是由糖醛酸成的具有不同链长的多糖链的混合物,分子量在3000-30000D之间，具有抗凝血作用。肝素已有70余年的使用历史，目前仍在广泛使用。但有生物利用度低，半衰期短，剂量个体差异大，自发性出血倾向，血小板减少症等缺点。

低分子量肝素是肝素分级或降解形成的分子量较小的片段，大部分分子量在8000D以下，按照降解方法及分子量的不同，目前分为那屈肝素钙，依诺肝素钠，达肝素钠等。

那屈肝素钙是低分子量肝素钙的一种，采用亚硝酸钠酸性条件下裂解肝素钠，转钙，醇沉得到。其欧洲药典规定的质量标准规定，抗Xa效价为95-130IU/mg，抗Xa/抗Ⅱa比值为2.5-4.0，分子量为3600-5000D。与肝素相比，那屈肝素钙抗血栓作用强，抗凝血作用弱，具有生物利用度高，半衰期长，出血倾向小的优点，与另外几种钠盐相比，出血副作用较小，更适用于临床使用，目前已逐步取代肝素应用于临床。

衡量那屈肝素钙的品质的标准有两个，一个是抗Xa因子效价，另一个就是抗Xa/抗Ⅱa比值，这两个标准的值越高，产品质量越好。公开号为CN103408676A的中国专利公开了“一种那屈肝素钙制备工艺”，其以亚硝酸钠法降解低分子量肝素钠并经硼氢化钠还原，然后依次醇沉、双氧水氧化、阴离子树脂转钙、双氧水氧化、醇沉获得那屈肝素钙。但是，该制备工艺整体工序较为复杂，涉及多次氧化、醇沉。同时，该专利的产品的抗Xa/抗Ⅱa比值虽然位于2.5-4.0之间，但整体偏低，仍需要进一步提高。

此外，该专利工艺制备的产品在干燥失重、小于2000级分的那屈肝素钙百分比例方面较高，影响那屈肝素钙的整体品质。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的在于提供一种那屈肝素钙的制备方法，使该制备方法能够提高那屈肝素钙抗Xa/抗Ⅱa比值；

本发明的另一个目的在于提供一种那屈肝素钙的制备方法，使该制备方法能够降低小于2000级分的那屈肝素钙百分比例；

本发明的再一个目的在于提供一种那屈肝素钙的制备方法，使该制备方法能够简化制备那屈肝素钙工艺步骤。

针对现有那屈肝素钙制备方法(CN103408676A)中，抗Xa/抗Ⅱa比值较低，且干燥失重比例以及小于2000级分的那屈肝素钙百分比例略高，影响产品质量，同时工序操作较繁琐的问题，本发明提供如下解决方案：

一种那屈肝素钙的制备方法，包括以下步骤：

步骤1、利用亚硝酸钠法制备低分子肝素钠降解液，再经还原获得还原液；

步骤2、还原液过滤，所得滤液加氯化钙溶液搅拌均匀并超滤获得超滤液；

步骤3、超滤液加入乙醇醇沉，沉淀物加水复溶、过滤，所得滤液除菌、冻干，获得那屈肝素钙成品。

作为优选，所述超滤的超滤膜分子量为1000-5000D。

作为优选，步骤1为：

步骤1.1、取肝素钠加水溶解，加冰醋酸调节pH值至2-6，加入亚硝酸钠于20-30℃下反应4-6h获得肝素钠降解液；

步骤1.2、所述肝素钠降解液用氢氧化钠调节pH值为8-12，然后向其中加入占肝素钠质量0.5％-5％的硼氢化钠还原4-16h，最后用冰醋酸调节pH值为4-8，获得还原液。

其中，作为优选，所述肝素钠和亚硝酸钠的质量比为2000:50-70，所述硼氢化钠加入量为肝素钠质量的0.5-5％。

作为优选，步骤2和步骤3所述过滤均为采用0.22μm滤膜过滤。

作为优选，所述氯化钙溶液的浓度为0.2-1.0mol/L，更优选为0.5mol/L。

作为优选，所述乙醇为95％乙醇。

作为优选，所述超滤均重复2-6次。在重复的过程中，每一次重复是取上次超滤后的滤液再次超滤。

作为优选，所述那屈肝素钙重均分子量为3600-5000D。

在上述方案以及优选方案中，本发明所述pH值、浓度、分子量、配比、用量等各参数均可以从限定的范围内任取一个点值，并不局限于范围的端点值，且可以和其它参数任意组合。例如，pH值2-6，可以取2、2.5、......3.8、4、5或6；硼氢化钠加入量可以为肝素钠质量0.5％、2％、3.5％......4％或5.0％。