[发明专利]用于DNA提取的方法和试剂盒

说明书

本申请是申请日为2009年5月22日、发明名称为“用于DNA提取的方法和试剂盒”、申请号为2009801290899的发明专利申请的分案申请。

技术领域

本发明涉及用于DNA提取的方法和试剂盒。

发明内容

本教导提供用于获得高数量、高质量的核酸并且精确地在短时间内获得核酸的组合物、方法和试剂盒。本教导一般涉及从生物材料中分离核酸，以使所述核酸与下游应用中的使用相适应(compatible with)的方法。在各种实施方式中，本教导涉及多羟基聚合物和洗涤剂用于将核酸与具有亲水表面的磁性颗粒结合、将核酸从所述磁性颗粒释放并且通过使用数种缓冲液提取核酸的用途。在一些实施方式中，提供了用于从生物材料中分离DNA的试剂盒。

本教导的提取和纯化方法提供了用于从生物样品、食品样品、水样品、环境样品、农业样品、生物药物样品或者药物样品中获得核酸(例如基因组DNA)的有用方法，所述核酸可用于下游应用中，例如所述生物材料、食品材料、水材料、环境材料、农业材料、生物药物材料或者药物材料来源的基因分型、检测、定量和鉴定，其中采用分子生物学方法，例如PCR。所提供的缓冲液系统在提取保持DNA完整性的高数量DNA中是独特的。其提供了高效率DNA提取并去除了PCR抑制剂。此外，使用标准的液体处理系统，可使用于提取和纯化核酸的程序(procedure)完全自动化。

本文所用的标题部分只是用于编排目的，不理解为以任何方式限制所描述的主题。本申请中所引用的所有文献和类似材料，包括但不限于专利、专利申请、文章、书籍和协议，不管此类文献和类似材料的形式如何，都以全文通过引用明确并入本文，用于任何目的。

附图说明

本领域技术人员将理解下文所描述的附图只用于说明目的。附图并无意以任何方式限制本教导的范围。

图1是说明如本教导的各种实施方式中所描述的DNA分离和纯化的方法的示意图。

图2说明如实施例6中所描述的DNA分离和纯化的DNA产率，其中按照实施例4中所描述的方法，从细胞计数为1562-50000的培养的Raji细胞分离基因组DNA。

图3说明如实施例7中所描述的DNA分离和纯化的DNA产率，其中按照实施例4中所描述的方法，从细胞计数为3500-110000的培养的K562细胞分离基因组DNA。

图4说明如实施例13中所描述的从基材中分离和纯化DNA后获得的基因分型分布(genotyping profiles)，其中按照实施例11的方法从生物样品中分离基因组DNA，并使用试剂盒进行处理，用于基因分型。

图5，在抑制剂的存在下，(加入)到洗涤溶液中的洗涤剂添加剂对从干燥于粗斜纹布(denim)上的血液中提取DNA的影响。

图6，在抑制剂的存在下，(加入)到洗涤溶液中的洗涤剂添加剂对从干燥于粗斜纹布上的血液中去除抑制剂的效率的影响。

具体实施方式

虽然结合各种实施方式来描述本教导，但并无意将本教导限制于此类实施方式。相反，如本领域技术人员将理解的，本教导涵盖了各种替代、修改和等同物。

本说明书中所用的绝大多数词语具有本领域技术人员所认为的那些词语的含义。本说明书中具体定义的词语具有本教导上下文中提供的整体含义和如本领域技术人员通常理解的含义。在词语或短语的本领域所理解定义与本说明书中具体教导的该词语或短语的定义相冲突的情况下，应以本说明书为准。本文所用的标题只是为了方便起见，并不理解为以任何方式进行限制。