[发明专利]快速筛选香蕉抗病相关基因的细胞模型

权利要求书

1.一种快速筛选香蕉抗病相关基因的细胞模型，其特征在于：该细胞模型的制备方法包括如下步骤：

(1)病原菌培养，诱导产生病原菌毒素，将病原菌毒素分离提取，得到病原菌粗毒素，贮存备用；

(2)将步骤(1)中得到的病原菌粗毒素分别加入香蕉抗病和感病品种的悬浮细胞培养系统，诱发香蕉细胞抗病反应，并分别收集香蕉细胞，即得到快速筛选香蕉抗病相关基因的细胞模型。

2.根据权利要求1所述的快速筛选香蕉抗病相关基因的细胞模型，其特征在于：步骤(1)所述的病原菌包括导致香蕉病害的真菌、细菌或病毒。

3.根据权利要求1所述的快速筛选香蕉抗病相关基因的细胞模型，其特征在于：步骤(1)中所述的诱导的条件为每40～60mL马铃薯液体培养基中接种一块病原菌菌丝体，于24～26℃持续光照条件下，120～150rpm振荡培养10～14天；

所述的病原菌菌丝体为病原菌于马铃薯固体培养基上，24～26℃光照培养6～8天，切取面积1～1.5cm²的菌丝体。

4.根据权利要求1所述的快速筛选香蕉抗病相关基因的细胞模型，其特征在于：步骤(2)中所述的病原菌粗毒素，与悬浮细胞培养系统按体积比1:19.5的比例混合。

5.根据权利要求1所述的快速筛选香蕉抗病相关基因的细胞模型，其特征在于：

步骤(2)中所述的悬浮细胞培养系统由香蕉悬浮细胞的细胞沉淀和香蕉细胞悬浮培养基按体积比0.5:19比例混合。

6.根据权利要求5所述的快速筛选香蕉抗病相关基因的细胞模型，其特征在于：所述的香蕉悬浮细胞的细胞沉淀通过如下步骤制备：分别取在香蕉细胞悬浮培养基中继代培养3～5天的大蕉和巴西蕉悬浮细胞，4000～5000rpm离心8～10分钟，去上清，即得细胞沉淀。

7.根据权利要求1所述的快速筛选香蕉抗病相关基因的细胞模型，其特征在于：步骤(2)中所述的诱发香蕉细胞抗病反应的条件为26±1℃，90～110rpm黑暗振荡培养；

步骤(2)中所述的收集香蕉细胞的时间为0、12、24、36、48h。

8.权利要求1～7任一项所述的快速筛选香蕉抗病相关基因的细胞模型在快速筛选香蕉抗病相关基因中的应用。

9.根据权利要求8所述的应用，其特征在于：包括如下步骤：

取权利要求1～7任一项所述的细胞模型，分别抽提RNA，进行实时荧光定量PCR分析，比较目的基因在香蕉抗病和感病品种的细胞中的表达模式；如果该目的基因的激活表达在抗病品种的细胞中比感病品种的细胞中更强、更快或持续时间更长，则说明该目的基因是香蕉抗病反应的正调控基因；如果该目的基因的表达抑制在抗病品种的细胞中比感病品种的细胞中更强烈，则说明该目的基因是香蕉抗病反应的负调控基因。