[发明专利]一种使用含有指示剂的酚胍盐裂解液提取核糖核酸的方法

权利要求书

1.一种使用含有指示剂的酚胍盐裂解液提取核糖核酸的方法，其特征在于该方法包括以下各步骤：

（1）向30-50毫克动物组织或植物组织中加入1毫升含有指示剂的酚胍盐裂解液，用匀浆器匀浆样本，或液氮研磨，得到匀浆液；

（2）将匀浆液在室温下放置5分钟，使得核酸与蛋白充分分离；

（3）向步骤（2）的匀浆液中加入0.2毫升氯仿，颠倒混匀15秒，使氯仿与匀浆液充分混匀，室温下放置3分钟，进行离心，离心分离的转速为12000转/分钟，离心分离的温度为4摄氏度，离心时间为15分钟，使水相与有机相彻底分离；

（4）经步骤（3）离心后的溶液分为三层，上层为含有核糖核酸（RNA）的无色水相，中间层为含有脱氧核糖核酸（DNA）的白色界相，下层为含有蛋白质的红色有机相，将上层含有核糖核酸的无色水相转移至试管中；

（5）在步骤（4）的试管中加入0.5毫升异丙醇沉淀核糖核酸（RNA），室温下保持10分钟，进行离心，离心分离的转速为12000转/分钟，离心分离的温度为4摄氏度，离心时间为10分钟；

（6）将步骤（5）离心后的上清液弃掉，保留核糖核酸（RNA）沉淀，向核糖核酸沉淀中加入1毫升75%乙醇洗涤，进行离心，离心分离的转速为8000转/分钟，离心分离的温度为4摄氏度，离心时间为5分钟；

（7）弃掉步骤（6）的上清液，加入去核糖核酸酶（RNase-free）的水，用移液枪反复吹打几次，溶解核糖核酸（RNA）。

2.如权利要求1所述的方法，其特征在于其中所述的含有指示剂的酚胍盐裂解液中的各组分为：

上述组分按量称重后，用冰醋酸调pH值至4-5，定容至1000毫升，所述的指示剂为中性红、甲基红中的任何一种。