[发明专利]维罗纳气单胞菌菌蜕、其制备方法及应用在审
| 申请号: | 201410080745.3 | 申请日: | 2014-03-06 |
| 公开(公告)号: | CN104232502A | 公开(公告)日: | 2014-12-24 |
| 发明(设计)人: | 姜娜;马志宏;邢薇;李铁梁;罗琳 | 申请(专利权)人: | 北京市水产科学研究所 |
| 主分类号: | C12N1/20 | 分类号: | C12N1/20;C12N15/74;A61K39/02;A61P31/04;C12R1/01 |
| 代理公司: | 北京律诚同业知识产权代理有限公司 11006 | 代理人: | 梁挥;祁建国 |
| 地址: | 100068*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 维罗纳 气单胞菌菌蜕 制备 方法 应用 | ||
1.一种维罗纳气单胞菌菌蜕,所述菌蜕是由裂解基因E在维罗纳气单胞菌中的诱导表达而形成的完整细菌空壳。
2.根据权利要求1所述的维罗纳气单胞菌菌蜕,其特征在于,所述维罗纳气单胞菌为保藏编号CGMCC No.7231的维罗纳气单胞菌CL0901。
3.根据权利要求1所述的维罗纳气单胞菌菌蜕,其特征在于,所述裂解基因E有效地连接到质粒pBBR1MCS2上得到质粒pBBR1MCS2-E。
4.一种制备维罗纳气单胞菌菌蜕的方法,所述方法包括以下步骤:
1)构建有效地连接有裂解基因E表达盒的重组质粒pBBR1MCS2-E;
2)将重组质粒pBBR1MCS2-E电转化大肠杆菌S17-1菌株的感受态细胞;
3)以含重组质粒pBBR1MCS2-E的大肠杆菌S17-1菌株转化维罗纳气单胞菌;
4)培养转化有重组质粒pBBR1MCS2-E的重组维罗纳气单胞菌,在42℃诱导裂解基因E的表达;和
5)诱导表达后12-16小时,收集菌蜕。
5.根据权利要求4所述的方法,其特征在于,所述维罗纳气单胞菌为保藏编号CGMCC No.7231的维罗纳气单胞菌CL0901。
6.根据权利要求5所述的方法,其特征在于,步骤2)所使用的转化方法为接合转化。
7.一种注射制剂,含有:
权利要求1-3中任一项所述的维罗纳气单胞菌菌蜕,或根据权利要求4-6中任一项的方法所获得的维罗纳气单胞菌菌蜕,和
磷酸盐缓冲液。
8.根据权利要求7所述的制剂,其特征在于,所述制剂的给药方式为腹腔注射。
9.一种用于鱼类的疫苗,含有权利要求1-3中任一项所述的维罗纳气单胞菌菌蜕,或根据权利要求4-6中任一项的方法所获得的维罗纳气单胞菌菌蜕。
10.根据权利要求9所述的疫苗,其中所述鱼类包括锦鲤和鲟鱼。
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