[发明专利]微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条及其制备方法和用途

说明书

技术领域

本发明涉及微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条及其制备方法和用途，适用于微量靶标物质的荧光检测。属于生物检测技术领域。 

背景技术

目前在微量靶标物质检测中，常用到高效液相色谱法、化学发光法、酶联免疫分析及侧向和渗滤层析等方法。其中，高效液相色谱法、化学发光法及酶联免疫法技术虽然准确可靠，但是操作过程复杂，耗时长，需特殊设备和专业人员，不易在基层医疗机构和现场普及。而侧向层析法操作简单快速、成本低，只需肉眼检测或简单仪器便可判读结果可作为疾病或违禁添加物检测的初步筛检方法。侧向层析技术常见的标记物有胶体金、胶体硒、乳胶、明胶等，其中运用最普遍且成功的标记物是胶体金，但胶体金免疫层析法灵敏度不高，受背景影响大，尤其是在检测全血或含色素的标本时，胶体金和血液的红色背景相近，容易对结果判读造成干扰。而且，胶体金试纸条市场已经趋向成熟与饱和，国内企业总体产能已经超过全球市场需求，基础科研领域没有获得质上的突破，出现大量的同质化科研课题，多种新技术都未能成功大规模应用。另外，虽然新标记和材料技术已崭露头角，但技术应用还不够成熟，无法大规模应用，有很些技术难题还有待继续研究攻克。 

发明内容

本发明的目的之一，是为了提供微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条，它利用层析和荧光检测原理，通过制成条状结构，可随时携带对样品进行检测。 

本发明的目的之二，是为了提供微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条的制备方法。 

本发明的目的之二，是为了提供微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条的用途。 

本发明的目的之一可以通过以下技术方案达到： 

微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条，其结构特点在于：包括底板，在底板上方从左端到右端依次设有样品吸收垫、结合垫、层析膜和吸水纸，所述样品吸收垫的右端压贴住结合垫的左端，结合垫的右端压贴住层析膜的左端，所述吸水纸的左端压贴住层析膜的右端，构成侧向层析检测结构；所述层析膜上从左到右制备有检测线和质控线；结合垫由聚酯纤维膜和设置在该聚酯纤维膜上标记了不同配体的多种荧光微球构成，层析膜由硝酸纤维膜及设置在该硝酸纤维膜上包含可特异结合靶标物质的不同配体的多条检测线构成。 

本发明的目的之一还可以通过以下技术方案达到： 

进一步地，所述检测线的数量可以大于二条；所述底板可以采用不吸水性的PVC材料制成。 

进一步地，所述荧光微球的粒径为20-400nm、激发波长为350-505nm、发射波长为440-515nm。 

本发明能经激发光源如便携式验钞笔，紫外灯等激发荧光微球后直接通过肉眼或检测仪器判读定性结果，且各显示结果之间无交叉反应，相互独立。具有结构简单、灵敏度高和使用方便的特点。 

本发明的目的之二可以通过以下技术方案达到： 

微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条的制备方法，其特征在于包括以下步骤： 

1）制备结合垫；将不同微量靶标物质的特异配体通过物理吸附或化学偶联的方式标记在不同荧光微球上，制备标记了不同配体的多种荧光微球，并按比例将其喷涂在聚酯纤维膜上，制得结合垫； 

2）制备层析膜，将可特异结合靶标物质的不同配体喷涂到硝酸纤维膜上制成多条检测线，同时，将抗配体的抗体包被成质控线，制成层析膜； 

3）按规格准备好底板、样品吸收垫和吸水纸； 

4）按规格在底板上依次搭接样品吸收垫、结合垫、层析膜及吸水纸，并按规格剪切宽度，制成微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条。 

本发明的目的之二还可以通过以下技术方案达到： 

进一步地，所述检测条上的配体为同一配体或不同配体对的夹心模式，用于检测样品中的靶标物质。 

进一步地，在层析过程中，若样品中含有待测靶标物质，靶标物质与荧光微球结合进行配体反应，形成“荧光微球-配体-靶标物质”三体复合物。 

进一步地，层析进行到层析膜时，检测线包被的另一或同一特异性配体可捕获包含靶标物质的三体复合物，进一步形成“荧光微球-配体-靶标物质-包被配体”双配体夹心复合物。 

本发明的目的之三可以通过以下技术方案达到： 

微量靶标物质多重联检的荧光微球侧向层析检测条的用途，其特征在于：用于对样品的微量靶标物质的荧光检测，检测方法包括以下步骤： 

1）往检测条的样品吸收垫上加入待测样本，反应5-20min；