[发明专利]一种检测P73基因及其启动子区甲基化状态的MSP法检测试剂盒

权利要求书

1.用于检测P73基因甲基化状态的引物组，其包含一对以上根据P73基因外显子或启动子序列设计的引物。

2.权利要求1所述的引物组，由序列为SEQ ID NO：1和SEQ ID NO：2的P73基因甲基化引物对、序列为SEQ ID NO：3和SEQ ID NO：4的P73基因非甲基化引物对、序列为SEQ ID NO：5和SEQ ID NO：6的P73基因启动子区甲基化引物对以及序列为SEQ ID NO：7和SEQ ID NO：8的P73基因启动子区非甲基化引物对组成。

3.权利要求2的引物组在制备用于检测P73基因及其启动子区甲基化状态的试剂中的应用。

4.一种检测P73基因及其启动子区甲基化状态的MSP法检测试剂盒，包含权利要求2的引物组。

5.权利要求4所述的试剂盒，使用该试剂盒中的各对引物进行PCR时，

PCR反应的反应体系为：

反应程序为：

其中X为各对引物的退火温度，其分别为：

P73基因甲基化引物对58℃、P73基因非甲基化引物对58℃、P73基因启动子区甲基化引物对64℃，P73基因启动子区非甲基化引物对60℃。

6.使用权利要求4的试剂盒非诊断检测P73基因及其启动子区甲基化状态的MSP方法，包括从样品中提取DNA、重硫酸盐处理DNA、使用权利要求4的试剂盒中的各对引物进行PCR反应、根据扩增片段的大小或有无确定样品的P73基因及其启动子区甲基化状态。

7.权利要求6的方法，其中PCR反应的反应体系为：

反应程序为：

其中X为各对引物的退火温度，其分别为：

P73基因甲基化引物对58℃、P73基因非甲基化引物对58℃、P73基因启动子区甲基化引物对64℃，P73基因启动子区非甲基化引物对60℃。