[发明专利]一株用于生产meso-2,3-丁二醇的基因工程菌及其应用无效
| 申请号: | 201410051821.8 | 申请日: | 2014-02-14 |
| 公开(公告)号: | CN103805551A | 公开(公告)日: | 2014-05-21 |
| 发明(设计)人: | 马翠卿;高超;徐友强;许平 | 申请(专利权)人: | 山东大学 |
| 主分类号: | C12N1/21 | 分类号: | C12N1/21;C12P7/18;C12R1/19;C12R1/01 |
| 代理公司: | 济南圣达知识产权代理有限公司 37221 | 代理人: | 李健康 |
| 地址: | 250100 山*** | 国省代码: | 山东;37 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 生产 meso 丁二醇 基因工程 及其 应用 | ||
1.一株用于生产meso-2,3-丁二醇的基因工程菌,其特征在于:所述基因工程菌是含有阴沟肠杆菌(Enterobacter cloacae subsp.dissolvens)SDM CGMCC No.4230的2,3-丁二醇合成基因簇budRABC的大肠埃希氏菌,其中,budRABC的核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示;该菌株命名为大肠埃希氏菌E.coli BL21/pETRABC,菌株已于2013年12月31日保藏于“中国典型培养物保藏中心”,保藏号为:CCTCC NO:M2013733。
2.权利要求1所述用于生产meso-2,3-丁二醇的基因工程菌在发酵底物葡萄糖生产meso-2,3-丁二醇中的应用。
3.如权利要求2所述的应用,其特征在于:所述发酵培养的方法是:在无菌条件下,取活化好的大肠埃希氏菌E.coli BL21/pETRABC菌液,以体积比为5~10%的接种量接种到发酵培养基中,在温度37±1℃,pH5.0~8.0、搅拌转速100~500rpm、通气量0.5~2.5vvm条件下培养36~72小时,其间,待检测培养基中葡萄糖的浓度降至20克/升以下时,补加800克/升的葡萄糖母液至培养基中葡萄糖的浓度为20~50克/升,当检测发酵液中meso-2,3-丁二醇的浓度不再增加时,发酵结束,分离出培养液,按常规方式提取meso-2,3-丁二醇;
其中,上述的发酵培养基配方为:1升蒸馏水中含:酵母粉4克,玉米浆干粉8克,磷酸二氢钾4克,乙酸钠6克,氯化钾2克,硫酸镁0.2克,1M MgSO4溶液1毫升,1MCaCl2溶液0.3毫升。
4.如权利要求3所述的应用,其特征在于:所述pH范围选6.0~7.5。
5.如权利要求3所述的应用,其特征在于:所述搅拌转速为300~450rpm。
6.如权利要求3所述的应用,其特征在于:所述通气量为1.0~2.0vvm。
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