[发明专利]一种来源于小眼虫的Δ4脂肪酸去饱和酶及其应用有效
| 申请号: | 201410043571.3 | 申请日: | 2014-01-29 |
| 公开(公告)号: | CN103820402A | 公开(公告)日: | 2014-05-28 |
| 发明(设计)人: | 朱贵明;王淑秋;孙洁;王迪迪;葛堂栋;江旭东;朴金花 | 申请(专利权)人: | 佳木斯大学 |
| 主分类号: | C12N9/02 | 分类号: | C12N9/02;C12N15/53;C12N15/85;C12N5/10;C12P7/64 |
| 代理公司: | 北京纪凯知识产权代理有限公司 11245 | 代理人: | 关畅;陈晓庆 |
| 地址: | 154007 黑*** | 国省代码: | 黑龙江;23 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 来源于 小眼 脂肪酸 饱和 及其 应用 | ||
1.一种蛋白,为如下(1)或(2)所示:
(1)SEQ ID No.2所示的蛋白;
(2)将SEQ ID No.2所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且功能相同的蛋白质。
2.权利要求1所述蛋白的编码基因。
3.根据权利要求2所述的编码基因,其特征在于:所述编码基因为如下中至少一种:
1)SEQ ID No.1中自5’末端起第10位至第1635位核苷酸所示的DNA分子;
2)在严格条件下与1)限定的DNA分子杂交且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子;
3)与1)或2)限定的DNA分子具有90%以上的同一性且编码权利要求1所述蛋白质的DNA分子。
4.含有权利要求2或3所述编码基因的重组载体、表达盒、转基因细胞系或重组菌。
5.一种蛋白组合物,由SEQ ID No.2所示的蛋白和SEQ ID No.4所示的蛋白组成。
6.一种蛋白组合物,由SEQ ID No.2所示的蛋白、SEQ ID No.5所示的蛋白和SEQ ID No.6所示的蛋白组成。
7.一种提高哺乳动物细胞中DHA(22:6n-3)合成能力的方法,包括如下步骤:将权利要求1所述蛋白的编码基因导入到出发细胞中,得到转基因细胞;与出发细胞相比,转基因细胞的DHA(22:6n-3)合成能力提高。
8.根据权利要求7所述的方法,其特征在于:所述编码基因是通过重组表达载体导入的,所述重组表达载体是将所述编码基因插入出发载体pcDNA3.1(-)的多克隆位点得到的。
9.权利要求1所述的蛋白在制备促进DHA(22:6n-3)合成的产品中的应用;
或,
权利要求5或6所述的蛋白组合物在制备促进DHA(22:6n-3)合成的产品中的应用。
10.权利要求1所述的蛋白在制备促进DPA(22:5n-3)转化成DHA(22:6n-3)的产品中的应用;
或,
权利要求5或6所述的蛋白组合物在制备促进DPA(22:5n-3)转化成DHA(22:6n-3)的产品中的应用;
或,
权利要求1所述的蛋白在制备促进△15脂肪酸去饱和酶将DPA(22:5n-3)转化成DHA(22:6n-3)的产品中的应用;
或,
权利要求1所述的蛋白在制备促进△15脂肪酸去饱和酶将LA(18:2n-6)和/或ARA(20:4n-6)转化成DHA(22:6n-3)的产品中的应用;
所述△15脂肪酸去饱和酶的氨基酸序列如SEQ ID No.4所示;
或,
权利要求1所述的蛋白在制备促进Δ6-脂肪酸去饱和酶和Δ5-脂肪酸去饱和酶将DPA(22:5n-3)转化成DHA(22:6n-3)的产品中的应用;
或,
权利要求1所述的蛋白在制备促进Δ6-脂肪酸去饱和酶和Δ5-脂肪酸去饱和酶将LA(18:2n-6)和/或ALA(18:3n-3)转化成DHA(22:6n-3)的产品中的应用;
所述Δ6-脂肪酸去饱和酶的氨基酸序列如SEQ ID No.6所示;
所述Δ5-脂肪酸去饱和酶的氨基酸序列如SEQ ID No.8所示。
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