[发明专利]多参数纸芯片电化学免疫传感器及肺癌标志物检测方法

权利要求书

1.一种多参数纸芯片电化学免疫传感器，其特征在于，包括覆盖层、过滤膜和可折叠纸芯片，其中：

在覆盖层上设置一个进样孔，在覆盖层的另一端设置第一梳齿，第一梳齿用于露出可折叠纸芯片上多个金属引线的末端；

过滤膜紧贴于进样孔的下方，过滤膜的尺寸大于进样孔且与进样孔的中心重合，用于过滤截留待测样品中较大的细胞；

可折叠纸芯片是具有亲水和疏水区域交替出现的蜡图案化滤纸芯片，包括第一滤纸芯片、第二滤纸芯片和位于中间位置的对折线，第一滤纸芯片与第二滤纸芯片能沿对折线折叠起来；通过覆盖层自身的粘结作用将覆盖层、过滤膜与第一滤纸芯片组装成一体，而第二滤纸芯片沿对折线与第一滤纸芯片折叠起来，这样，在敏感区与不同待测物特异性识别后，第二滤纸芯片与第一滤纸芯片折叠起来即可用于检测各敏感区识别待测物质引起的电化学信号变化；

在第一滤纸芯片的一端部设置第二梳齿，当第一滤纸芯片与第二滤纸芯片折叠后，第二梳齿用于露出多个金属引线的末端；在靠近对折线的一侧和第二梳齿之间设置疏水蜡区域、多个敏感区、分液沟道、中心引流孔和多个分液孔；中心引流孔位于分液沟道的直线段的中心位置且与进样孔、过滤膜的中心垂直线沿该多参数纸芯片免疫电化学传感器的垂直竖向方向重合；多个分液孔位于中心引流孔的两侧，且多个分液孔分别与分液沟道的多个V型段的一端连接，每个V型段的一端设置敏感区，用以引导液体样品分流进入到敏感区而不发生渗漏；

在第二滤纸芯片的上面设有中心引流孔、多个引流孔和多个液流沟道；在靠近对折线的另一侧设有中心引流孔，该中心引流孔与第一滤纸芯片上的中心引流孔沿对折线呈对称分布；多个引流孔与第一滤纸芯片上的多个敏感区呈对称分布；在第二滤纸芯片上且远离对折线的端部设有多个液流沟道，该液流沟道一端与引流孔连接，另一端则与第二滤纸芯片的边缘连接且沿对折线与第一滤纸芯片上的第二梳齿呈对称分布；

在第二滤纸芯片的背面设有银/氯化银参比电极、多个工作电极、多个金属引线；银/氯化银参比电极、多个工作电极、多个金属引线的位置分别与上面的中心引流孔、多个引流孔和多个液流沟道一一对应，银/氯化银参比电极和各工作电极沿对折线分别与各敏感区、中心引流孔呈对称分布。

2.根据权利要求1所述的多参数纸芯片电化学免疫传感器，其特征在于，所述覆盖层为医用胶带，用于保护可折叠纸芯片上敏感区的试剂不流失、不受外界污染，同时对过滤膜和可折叠纸芯片的组装起到粘接作用。

3.根据权利要求1所述的多参数纸芯片电化学免疫传感器，其特征在于，所述过滤膜选取GR过滤膜、GX过滤膜中的一种，用于将人体液中的细胞分离截留在过滤膜上，其余物质则透过过滤膜后再经分液沟道分流进入到第一滤纸芯片的敏感区，用以保证样品全部经过滤膜过滤后进入可折叠纸芯片的分液沟道而不发生渗漏。

4.根据权利要求1所述的多参数纸芯片电化学免疫传感器，其特征在于，所述敏感区是连通过滤膜过滤出样品和第二滤纸芯片上的工作电极的关键单元；敏感区表面通过物理吸附和化学交联法固定不同的石墨烯-金属复合纳米材料、电子媒介体、不同抗体和辅助试剂，石墨烯-金属复合纳米材料用以促进对待测物质的免疫识别和电子传递能力、稳定性和固定吸附能力，在敏感区与不同待测物特异性识别后，结合第二滤纸芯片上的工作电极和小型电化学仪表或电化学工作站，来实现对人体液中多参数疾病标志物的快速检测。

5.根据权利要求1所述的多参数纸芯片电化学免疫传感器，其特征在于，所述敏感区的通道数为4-8之间，各敏感区呈等间距分布在与对折线平行的方向上。

6.根据权利要求1所述的多参数纸芯片电化学免疫传感器，其特征在于，所述分液沟道的数量和形状根据敏感区的通道数做出调整，用以方便实现敏感试剂在各敏感区的批量修饰。

7.根据权利要求4所述的多参数纸芯片电化学免疫传感器，其特征在于，所述石墨烯-金属复合纳米材料中的金属为铂、金、银、钯中的一种或任两种组合。

8.根据权利要求4所述的多参数纸芯片电化学免疫传感器，其特征在于，所述电子媒介体是从硫瑾、亚甲基蓝、铁氰酸盐、普鲁士蓝、二茂铁及其衍生物和铑/锇离子聚合物组成的组中选择出的一种，用于提高电子传递速率。