[发明专利]药物中番泻苷A、番泻苷B的定量检测方法

权利要求书

1.一种药物中番泻苷A、番泻苷B的定量检测方法，其特征在于采用高效液相色谱法进行检测，所述检测方法包括如下步骤：

a.确定色谱条件：

C18色谱柱;

流动相：在1000ml的乙腈-醋酸-醋酸钠缓冲液（pH3.0-9.0）（1→10）(20-60:40-80)混合溶液中，加入1.25-4.96g四庚基溴化铵为流动相；

检测波长：240-360nm;

柱温：25-45℃;

体积流量：0.8-1.2ml/min;

进样量：5-30μl；

b.番泻苷A、番泻苷B的标准曲线绘制：取经真空干燥12h的番泻苷A及番泻苷B的对照品，在50ml棕色容量瓶中配制成0.2064mg/ml的番泻苷A标准液，在25ml棕色容量瓶配制成0.4048mg/ml的番泻苷B标准液，分别取5ml番泻苷A标准液和5ml番泻苷B标准液，混合均匀，制成混合液，然后分别吸取不同体积的混合液配制成不同浓度，采用步骤a中色谱条件并利用高效液相色谱仪进行检测，以进样质量为横坐标，峰面积为纵坐标，将测得上述不同浓度标准液的进样质量和峰面积，通过线性回归得：

番泻苷A的线性方程为：Y_A=768760X_A－2437.4(r²=0.9997)；

番泻苷B的线性方程为：Y_B=751201X_B－659.67(r²=0.9999)；

其中，Y_A表示番泻苷A利用高效液相色谱仪进行检测出的峰面积，Y_B表示番泻苷A利用高效液相色谱仪进行检测出的峰面积，X_A表示番泻苷A的进样质量，X_B表示番泻苷B的进样质量，r为相关系数；

c.样品含量测定：配制样品溶液，采用步骤a中色谱条件并利用高效液相色谱仪对样品溶液进行检测，根据测得峰面积通过b步骤中测得的线性方程分别计算样品中番泻苷A及番泻苷B的质量，然后通过与样品溶液中的样品重量相除分别计算出样品中番泻苷A及番泻苷B的含量。

2.根据权利要求1所述的药物中番泻苷A、番泻苷B的定量检测方法，其特征在于所述a步骤确定的色谱条件为：

流动相：在1000ml的乙腈-醋酸-醋酸钠缓冲液（pH5.0）（1→10）(35∶65)混合溶液中，加入2.45g四庚基溴化铵为流动相；

检测波长：340nm;

柱温：40℃;

体积流量：1ml/min;

进样量：10μl。

3.根据权利要求2所述的药物中番泻苷A、番泻苷B的定量检测方法，其特征在于：所述c步骤中的样品溶液配制方法为：将称量好的药物样品加入溶剂中，经超声处理，放冷秤取重量，接着加入所述溶剂补足减失质量，然后经过滤制得样品溶液。

4.根据权利要求3所述的药物中番泻苷A、番泻苷B的定量检测方法，其特征在于：所述c步骤中的样品溶液配制方法为：秤取药物样品0.14g置于容器中，加入25ml质量浓度为0.1%的NaHCO₃溶液，称重，然后超声处理15min，放冷称质量，接着用质量浓度为0.1%的NaHCO₃溶液补足减失质量，然后用厚度为0.45μm的微孔滤膜滤过，制得样品溶液。

5.根据权利要求1-4任一项所述的药物中番泻苷A、番泻苷B的定量检测方法，其特征在于：所述c步骤中配制样品溶液所采用的溶剂为质量浓度为30%甲醇、质量浓度50%甲醇、甲醇-碳酸氢钠溶液和质量浓度0.1%的碳酸氢钠溶液中的一种。

6.根据权利要求5所述的药物中番泻苷A、番泻苷B的定量检测方法，其特征在于：所述流动相中的乙腈为色谱纯乙腈，所述醋酸为分析纯冰醋酸。

7.根据权利要求5所述的药物中番泻苷A、番泻苷B的定量检测方法，其特征在于：所述醋酸钠为分析纯醋酸钠，所述四庚基溴化铵为分析纯四庚基溴化铵。

8.根据权利要求1所述的药物中番泻苷A、番泻苷B的定量检测方法，其特征在于：所述c步骤中配制样品溶液的温度＜80℃。