[发明专利]一种兽药残留的检测方法

说明书

技术领域

本发明涉及以一种检测方法，特别是涉及一种兽药残留的检测方法。

背景技术

兽药在防治动物疾病、提高生产效率、改善畜产品质量等方面起着十分重要的作用。然而，由于养殖人员对科学知识的缺乏以及一味地追求经济利益，致使滥用兽药现象在当前畜牧业中普遍存在。

随着人们对动物源食品由需求型向质量型的转变，动物源食品中的兽药残留已逐渐成为全世界关注的一个焦点。兽药残留是指用药后蓄积或存留于畜禽机体或产品(如鸡蛋、奶品、肉品等)中原型药物或其代谢产物，包括与兽药有关的杂质残留。目前，在动物源食品中较容易引起兽药残留量超标的兽药主要有抗生素类、磺胺类和激素类等药物。

滥用兽药极易造成动物源食品中有害物质的残留，这对人体健康造成直接危害。例如长期食用兽药残留超标的食品后，当体内蓄积的药物浓度达到一定量时人体会产生多种急慢性中毒现象。目前，国内外已有多起有关人食用盐酸克仑特罗超标的猪肺脏而发生急性中毒事件的报道。

四环素类药物能够与骨骼中的钙结合，抑制骨骼和牙齿的发育。磺胺类药物能够破坏人体造血机能等。另一方面，动物机体长期反复接触某种抗菌药物后，其体内敏感菌株受到选择性的抑制，从而使耐药菌株大量繁殖，耐药性细菌的产生使得一些常用药物的疗效下降甚至失去疗效。此外，滥用兽药对畜牧业的发展和生态环境也造成极大危害。动物用药后，一些性质稳定的药物随粪便、尿被排泄到环境中后仍能稳定存在，从而造成环境中的药物残留。长期滥用药物严重制约着畜牧业的健康持续发展。如长期使用抗生素易造成畜禽机体免疫力下降，影响疫苗的接种效果，还可引起畜禽内源性感染和二重感染。

对动物性食品中的兽药残留进行监控的一个重要手段就是建立快速准确的残留分析方法。目前，报道的文献及国家标准中大多是单一兽药或单一种类兽药的检测方法，但在实际工作中，由于动物性食品安全的保证需要多个指标进行综合指证，因此，单个样本常需要多次检测工作，极大的浪费了人力、物力及财力。多残留的检测能够更好的节省时间、提高工作效率，并能更加有效地监测动物产品的安全性。另一方面，国内外报道的动物源性食品中药物残留检测的检测方法主要有液相色谱法（HPLC）、气相色谱-质谱联用法(GC-MS)、液相色谱-串联质谱联用法(LC-MS/MS)、酶联免疫法及生物传感器技术。

酶联免疫分析技术(ELISA)是一种将酶化学反应的敏感性和抗原抗体免疫反应的特异性相结合的方法，其敏感性和特异性较好。ELISA具有样品前处理简单，纯化步骤少，大量样本分析时间短，适合于做成试剂盒现场筛选等优点，使其可实现快速现场监测，是现阶段食品安全检测领域应用较多的一项检测技术。但它也存在着很多缺陷：对试剂的选择性高，很难同时分析多种成分；对结构类似的化合物有一定程度的交叉反应；分析分子量很小的化合物或很不稳定的化合物有一定的困难。

生物传感器是由一种生物敏感膜和电化学转换器两部分配合，对特定种类的化学物质或生物活性物质具有选择性和可逆响应的分析装置。在兽药残留分析上得到了较广泛的应用。虽然生物传感器具有微型化、响应速度快、样品用量少的特点，但还存在着结果的稳定性、重现性和使用寿命方面的问题。

现有技术的方法常有灵敏度不高、前处理繁琐、检测药物单一或重现性不好等问题，很难满足对药物残留的同时确证检测。

液质联用（HPLC-MS）的检测方法以液相色谱作为分离系统，质谱为检测系统。样品在质谱部分被离子化后，经质谱的质量分析器将离子碎片按质量数分开，经检测器得到质谱图。液质联用体现了色谱和质谱优势互补，将色谱对复杂样品的高分离能力，与MS具有高选择性、高灵敏度及能够提供相对分子质量与结构信息的优点结合起来，在药物分析领域具有了广泛的应用。液质联用（HPLC-MS）分析样品中定性和定量方面的优势是单独液相分析不能媲美的。

发明内容

本发明解决的技术问题是：提供一种新的兽药残留的检测方法，具体来说，其是通过液质联用的检测方法实现多种类多样品的检测。

具体来说，本发明是通过如下技术方案实现的：

一种兽药残留的检测方法，其特征在于，所述方法包括如下步骤：

（1）样品的处理：将待测样品进行前处理，加入提取剂后进行匀浆，之后进行超声提取，之后进行第一次离心分离得到上清液，用氮气将上清液吹干后得到的残余物用初始流动相溶解，混匀，之后进行第二次离心分离得到上清液，取上清液进行微孔滤膜过滤得到的滤液用于UPLC-MS/MS测定；

（2）兽药残留的测定