[发明专利]一种高温甘露聚糖酶ManAHr的制备方法及其基因和应用有效
| 申请号： | 201410029518.8 | 申请日： | 2014-01-22 |
| 公开（公告）号： | CN103789282A | 公开（公告）日： | 2014-05-14 |
| 发明（设计）人： | 詹志春;熊海容;王亚伟;周樱 | 申请（专利权）人： | 武汉新华扬生物股份有限公司 |
| 主分类号： | C12N9/24 | 分类号： | C12N9/24;C12N15/56;C12N15/63;C12N1/19;C12R1/84 |
| 代理公司： | 武汉华旭知识产权事务所 42214 | 代理人： | 周宗贵;刘荣 |
| 地址： | 430074 湖北*** | 国省代码： | 湖北;42 |
| 权利要求书： | 查看更多 | 说明书： | 查看更多 |
| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 高温 甘露 聚糖 manahr 制备 方法 及其 基因 应用 | ||
1.一种高温甘露聚糖酶ManAHr，其特征在于：其氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。
2.一种编码权利要求1所述高温甘露聚糖酶ManAHr的基因，其特征在于：其碱基序列如SEQ ID NO.2所示。
3.一种包含有权利要求2所述基因的重组表达质粒pPIC9K-ManAHr。
4.一种包含有权利要求2所述基因的重组毕赤酵母菌株ManAHr-GS115。
5.权利要求1所述高温甘露聚糖酶ManAHr的制备方法，其特征在于包括以下步骤：（1）、依据耐热甘露聚糖酶ManA3d的基因序列，在不改变其氨基酸序列的条件下，对其进行基因重排和优化密码子，去除毕赤酵母稀有密码子，并提高mRNA的二级结构稳定性，获得优化的甘露聚糖酶ManAHr基因，其基因序列如SEQ ID NO.2所示；（2）、将步骤（1）中甘露聚糖酶ManAHr基因的5'端和3'端位置分别设计EcoR I和Not I酶切位点，完成全基因合成后插入表达载体pPIC9K，构建重组质粒pPIC9K-ManAHr；（3）、将步骤（2）中重组质粒pPIC9K-ManAHr采用Dra I线性化该重组质粒后，转化毕赤酵母GS115感受态细胞，并筛选获得产酶最高的重组毕赤酵母菌株ManAHr-GS115；（4）、将步骤（3）中重组毕赤酵母菌株ManAHr-GS115接种于毕赤酵母发酵培养基，并维持甲醇诱导产酶，从而获得甘露聚糖酶ManAHr。
6.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（2）和步骤（4）中所述的甘露聚糖酶ManAHr被分泌至胞外培养液中。
7.权利要求1所述的高温甘露聚糖酶ManAHr，在饲料、食品、造纸、洗涤和医药中的应用。
该专利技术资料仅供研究查看技术是否侵权等信息，商用须获得专利权人授权。该专利全部权利属于武汉新华扬生物股份有限公司，未经武汉新华扬生物股份有限公司许可，擅自商用是侵权行为。如果您想购买此专利、获得商业授权和技术合作，请联系【客服】
本文链接：http://www.vipzhuanli.com/pat/books/201410029518.8/1.html，转载请声明来源钻瓜专利网。
