[发明专利]一种活体提取蛇足石杉生物总碱的方法

说明书

技术领域

本发明涉及一种蛇足石杉生物总碱的提取方法，具体指采用蛇足石杉活体为原料，提取完生物总碱的蛇足石杉又在原生境下重新栽活的方法。

背景技术

蛇足石杉俗名千层塔，属石杉科石杉属，是一种多年生蕨类植物。蛇足石杉全草可供药用，味辛、平、甘，民间用于治疗跌打损伤、肌肉痉挛、坐骨神经痛、神经性头痛等疾病。

蛇足石杉中最有价值的药效成分为石杉碱甲、石杉碱乙等生物总碱，提取生物总碱是蛇足石杉最主要的资源利用方式，但蛇足石杉也是国家一级濒危保护植物，对生境要求苛刻、繁殖难度大、生长极其缓慢，近年来的开发利用已经使得野生资源面临枯竭，蛇足石杉干草的价格已从过去的20元/公斤猛增至200元/公斤，增长势头仍在延续。

人工栽培是保护和利用蛇足石杉资源的较佳途径，但由于蛇足石杉生长极其缓慢，使得常规的栽培利用没有实用价值。活体提取蛇足石杉生物总碱是将蛇足石杉从生长地拔除，提取完生物总碱后又在原生境重新栽活的资源利用方法，非常有利于蛇足石杉这类生长缓慢、繁殖难度大、附加值高的植物资源保护和利用，而且，通过提取生物总碱对植物体产生刺激，还会加速蛇足石杉进行次生代谢，产生更多的生物总碱。

提取完后重新栽活，栽活一段时间后又提取，如此循环往复，是一种十分理想的蛇足石杉资源保护和利用方式，要实现这样的资源保护和利用方式，现阶段还存在提取率低、操作麻烦、提取完生物总碱的蛇足石杉难以重新栽活等技术难题，因而，现有技术不能满足蛇足石杉资源保护和利用的需要。 

发明内容

为解决上述从蛇足石杉活体提取生物总碱又重新栽活的现有技术存在的难题，本发明人经过大量的科学实践，终于发明出一种具有一定提取率、操作相对简单、蛇足石杉成活率相对较高、具有较强实用价值的方法。

本发明包括以下几个步骤：

（1）植株采收前的准备：在植株采收前3-7天用稀释1000-1500倍的杜邦易保+质量分数为0.1-0.2%的磷酸二氢钾溶液喷施采收植株一次。杜邦易保是美国杜邦公司生产的一种新型高效保护性杀菌剂，是由化合物恶唑烷二酮与代森猛锌复配而成，本发明优选的杜邦易保是68.75%水分散粒剂，其中代森猛锌质量分数为64%，霜尿氰质量分数为8%。

（2）植株的采收和生物总碱提取：将采收植株连根拔起，洗去根部的泥土，根部朝下，放入竹筐固定，将竹筐放入提取罐，以质量分数为0.3-1.5%的酒石酸溶液为溶剂，溶剂与蛇足石杉植物体的体积质量比为5：1-20：1，常温下温和提取5-60分钟，提取液过滤后上大孔阳离子交换树脂吸附生物碱，吸附后流出液进入提取罐循环提取，体积质量比中体积的单位为毫升，质量的单位为克。

经检测，上述提取过程中蛇足石杉生物总碱的转移率可达20-50%，已具备很强的实用价值。

（3）植株的重新栽培：将提取完的植株用无菌水淋洗，洗去残留的有机酸，将植株的根部用质量分数为0.05-0.15%的萘乙酸+质量分数为0.01-0.02%的6-BA（6-苄氨基嘌呤）+1-2ppm的BR(芸苔素内酯)浸泡3-10秒，此法可有效促进生根和萌芽，处理完后，将植株重新栽培在采收的地方，并喷施稀释1000-2000倍的杜邦易保+质量分数为0.1-0.2%的磷酸二氢钾溶液一次。

经检测，运用本发明对蛇足石杉重新栽培，成活率达到了80%以上，少量未成活的植株可再次用于提取有效成分，不会浪费资源，具备很强的实用性。

与现有技术相比，本发明的有益效果是：通过对植株采收前进行独特的预处理、提取时运用适合的条件进行生物总碱提取、提取完后又用独特的手段进行处理，既保证了蛇足石杉生物总碱具备一定的提取率，又保证了植株80%以上的重新栽培成活率，并且操作相对简单，具备创造性和很强的实用价值。

本发明有效解决了蛇足石杉资源保护与资源利用的矛盾，对于保护、开发和利用蛇足石杉植物资源具有显著意义，对于其它珍惜植物资源的保护与利用也有很好的启示，应用前景广阔。

具体实施方式

以下对一种活体提取蛇足石杉生物总碱的方法进行详细说明。

实施例1：

（1）植株采收前的准备：在植株采收前5天用稀释1100倍的杜邦易保+质量分数为0.11%的磷酸二氢钾溶液喷施采收植株一次。其中杜邦易保是68.75%水分散粒剂，其中代森猛锌质量分数为64%，霜尿氰质量分数为8%。