[发明专利]包合物包合率测定仪的测定方法

权利要求书

1.一种包合物包合率测定仪的测定方法，其特征是按如下步骤进行： 

(1)备料：市购或网购足量的三羟甲基氨基甲烷粉剂、质量浓度为37％的浓盐酸、蛋白粉、无水乙醇；按实验设计要求向有关企业订购梯度系列齐全的不同包合率的固态β-环糊精-药物包合物标准品； 

(2)溶液的制备： 

①取6.59g三羟甲基氨基甲烷和7.83mL浓盐酸，用蒸馏水配制成1000mL浓度为0.1mol·L^-1pH=7.43的三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲溶液； 

②以三羟甲基氨基甲烷-盐酸缓冲溶液为溶剂，配制与备料匹配的浓度为1.0×10^-5mol·L^-1的蛋白标准溶液； 

③以无水乙醇为溶剂，配制与备料匹配的浓度为1.0×10^-3mol·L^-1的梯度系列不同包合率的β-环糊精-药物包合物标准溶液； 

(3)仪器校正：取25μL已知包合率的包合物标准溶液注入含2.5mL蛋白标准溶液的样品管中，打开激发光源并将光引入样品管中，激发样品管中被测分子中的电子并导致发出荧光，此荧光经光电倍增管将光信号转化为电信号，经芯片计算出样品的包合率，通过比较当前的包合率与计算出的包合率，进行仪器校正； 

(4)荧光强度-包合率标准曲线的建立：将25μL不同包合率的β-环糊精-药物包合物标准溶液逐一注入含2.5mL蛋白标准溶液的样品管 中，分别检测其荧光发射强度，此荧光强度经芯片拟合后得到以荧光强度为纵坐标，包合物的包合率为横坐标的荧光强度-包合率标准曲线； 

(5)样品包合率的测定：将25μL待测样品注入含2.5mL蛋白标准溶液的样品管中，检测其荧光发射强度，此荧光强度经过芯片代入已拟合的荧光强度-包合率标准曲线中，得到对应的包合率即为该样品的包合率。