[发明专利]在空气-液体界面处培养人胚胎干细胞以用于分化成胰腺内分泌细胞

权利要求书

1.一种可用于诱导衍生自多能干细胞的细胞的分化的培养基，所述培养基包括生长培养基，所述生长培养基补充有：

a. ALK5抑制剂，所述ALK5抑制剂选自：ALK5抑制剂II、ALK5i、SD208、TGF-B抑制剂SB431542、ITD-1、LY2109761、A83-01、LY2157299、TGF-β受体抑制剂V、TGF-β受体抑制剂I、TGF-β受体抑制剂IV、TGF-β受体抑制剂VII、TGF-β受体抑制剂VIII、TGF-β受体抑制剂II、TGF-β受体抑制剂VI、TGF-β受体抑制剂III；

b. BMP受体抑制剂，所述BMP受体抑制剂选自LDN-193189、头蛋白或脊索发生素；以及

c. 甲状腺激素，所述甲状腺激素选自三碘甲状腺原氨酸、四碘甲状腺原氨酸、三碘甲状腺原氨酸的类似物、四碘甲状腺原氨酸的类似物、以及它们的混合物；

其中所述多能干细胞是非胚胎来源的多能干细胞，H1、H7、H9建立的细胞系的多能干细胞，或诱导的多能干细胞。

2.根据权利要求1所述的培养基，所述培养基还包含选自SANT-1或HPI-1的SHH信号转导途径拮抗剂。

3.根据权利要求2所述的培养基，所述培养基还包含视黄酸。

4.根据权利要求3所述的培养基，所述培养基包含ALK5抑制剂II、SANT-1、LDN-193189和视黄酸。

5.根据权利要求4所述的培养基，所述培养基还包含一种或多种补充剂，所述一种或多种补充剂选自：

a. smoothened受体抑制剂，所述smoothened受体抑制剂选自MRT10或环杷明；

b. 抗坏血酸；

c. 肝素；以及

d. 硫酸锌。

6.根据权利要求4所述的分化培养基，其中所述生长培养基选自MCDB-131培养基和BLAR培养基。

7.根据权利要求5所述的分化培养基，其中所述生长培养基补充有ALK5抑制剂II、SANT-1、LDN-193189、肝素、硫酸锌和视黄酸。

8.一种可用于诱导多能干细胞的分化的培养基，所述培养基包括生长培养基，所述生长培养基补充有：

a. ALK5抑制剂，所述ALK5抑制剂选自：ALK5抑制剂II、ALK5i、SD208、TGF-B抑制剂SB431542、ITD-1、LY2109761、A83-01、LY2157299、TGF-β受体抑制剂V、TGF-β受体抑制剂I、TGF-β受体抑制剂IV、TGF-β受体抑制剂VII、TGF-β受体抑制剂VIII、TGF-β受体抑制剂II、TGF-β受体抑制剂VI、TGF-β受体抑制剂III；

b. 甲状腺激素，所述甲状腺激素选自三碘甲状腺原氨酸、四碘甲状腺原氨酸、三碘甲状腺原氨酸的类似物、四碘甲状腺原氨酸的类似物、以及它们的混合物；和

c. SHH信号转导途径拮抗剂，所述SHH信号转导途径拮抗剂选自SANT-1或HPI-1；

其中所述多能干细胞是非胚胎来源的多能干细胞，H1、H7、H9建立的细胞系的多能干细胞，或诱导的多能干细胞。

9.根据权利要求8所述的培养基，还包含视黄酸。

10.根据权利要求9所述的培养基，还包含抗坏血酸。

11.根据权利要求8所述的培养基，还包含一种或多种补充剂，所述一种或多种补充剂选自：

a. BMP受体抑制剂，所述BMP受体抑制剂选自LDN-193189、头蛋白或脊索发生素；

b. 肝素；以及

c. 硫酸锌。

12.根据权利要求11所述的分化培养基，其中所述生长培养基选自MCDB-131培养基和BLAR培养基。