[发明专利]免疫原性裂解物的制备方法、获得的裂解物、负载有该裂解物的树突状细胞以及含有该裂解物或树突状细胞的药物组合物

权利要求书

1.一种用于制备免疫原性裂解物的方法，该方法包括以下步骤：

i)提供来自至少两种不同细胞系的同种异体间皮瘤肿瘤细胞；

ⅱ)诱导肿瘤细胞的坏死或凋亡；

ⅲ)裂解坏死或凋亡的肿瘤细胞，以获得裂解物。

2.根据权利要求1所述的方法，其中，至少一种肿瘤细胞系来自具有如下免疫结构的肿瘤组织样本：

-每mm²多于500个CD3⁺细胞；

-每mm²多于200个CD45RO⁺细胞；

-每mm²少于50个FoxP3⁺细胞；和

-每mm²少于1000个CD206⁺细胞。

3.根据权利要求1或2所述的方法，其中，至少两种肿瘤细胞系来自具有如下免疫结构的肿瘤组织样本：

-每mm²多于500个CD3⁺细胞；

-每mm²多于200个CD45RO⁺细胞；

-每mm²少于50个FoxP3⁺细胞；和

-每mm²少于1000个CD206⁺细胞。

4.根据前述权利要求中任意一项所述的方法，其中，所述间皮瘤肿瘤细胞的免疫原性在诱导坏死或凋亡之前被增强。

5.根据前述权利要求中任意一项所述的方法，其中，所述间皮瘤肿瘤细胞的免疫原性通过以下方式被增强：

将细胞在41.2℃或更高的温度下孵育1-120分钟，优选20-50分钟，最优选约30分钟，和/或通过将细胞暴露于氧化修饰，和/或将细胞暴露于组蛋白脱乙酰酶抑制剂，和/或将细胞暴露于DNA甲基转移酶抑制剂。

6.根据前述权利要求中任意一项所述的方法，其中，所述间皮瘤肿瘤细胞来自人。

7.根据前述权利要求中任意一项所述的方法，其中，所提供的间皮瘤肿瘤细胞包括来自至少三种，优选至少五种肿瘤细胞系的细胞，所述肿瘤细胞系优选为间皮瘤肿瘤细胞系。

8.根据前述权利要求中任意一项所述的方法，其中，所用的同种异体间皮瘤肿瘤细胞选自如下细胞系中的两种或多种：

Thorr01(保藏号DSMACC3191)，Thorr02(保藏号DSMACC3192)，Thorr03(保藏号DSMACC3193)，Thorr04(保藏号DSMACC3194)，Thorr05(保藏号DSMACC3195)，Thorr06(保藏号DSMACC3196)。

9.根据前述权利要求中任意一项所述的方法，其中，通过将细胞循环冻融以诱导所述同种异体间皮瘤肿瘤细胞的坏死。

10.根据前述权利要求中任意一项所述的方法，其中，通过将细胞置于至少15kJ/m²的紫外线(UV)-B-辐射以诱导所述同种异体间皮瘤肿瘤细胞的凋亡。

11.根据前述权利要求中任意一项所述的方法，其中，将间皮瘤肿瘤细胞裂解后，将所得到的裂解物进行至少50Gy，优选至少100Gy的辐射并离心。

12.根据权利要求1-11中的任意一项所述的方法获得的裂解物。

13.负载有权利要求12所述的裂解物的树突状细胞。

14.根据权利要求13所述的树突状细胞，其中，所述树突状细胞是自体的或同种异体的，优选地，所述树突状细胞是自体的。

15.根据权利要求13或14所述的树突状细胞，其中，所述树突状细胞是未成熟的或成熟的，优选地，所述树突状细胞是未成熟的。

16.根据权利要求13-15中的任意一项所述的树突状细胞，其中，所述树突状细胞来自人。

17.根据权利要求13-16中的任意一项所述的树突状细胞，其中，相对于每当量的树突状细胞，所述树突状细胞负载有至少0.1当量的肿瘤细胞，优选至少0.2当量的肿瘤细胞，更优选至少0.5当量的肿瘤细胞，最优选至少1当量的肿瘤细胞。