[发明专利]包括原始小球藻脂质途径基因的基因工程化微生物菌株

权利要求书

1.一种重组核酸，包含编码原始小球藻脂质生物合成蛋白的编码序列。

2.如权利要求1所述的重组核酸，其中该脂质生物合成蛋白是选自表1中的蛋白。

3.如权利要求2所述的重组核酸，其中该蛋白相比表1中的蛋白具有至少一个点突变。

4.如权利要求1所述的重组核酸，其中该蛋白与表1中的蛋白具有至少50％、60％、70％、80％、85％、90％或95％的序列一致性。

5.如权利要求1至4中任一项所述的重组核酸，其中该编码序列与一个启动子可操作连接。

6.如权利要求1至5中任一项所述的重组核酸，其中该编码序列与一个非翻译控制元件可操作连接。

7.如权利要求1至6中任一项所述的重组核酸，其中该编码序列与一个靶向序列可操作连接。

8.如权利要求7所述的重组核酸，其中该靶向序列是选自质体靶向序列和线粒体靶向序列的组的转运肽。

9.如权利要求1至8中任一项所述的重组核酸，其中该核酸是DNA分子。

10.如权利要求1至9中任一项所述的重组核酸，该重组核酸编码功能性原始小球藻脂质生物合成蛋白。

11.如权利要求3所述的重组核酸，其中该蛋白是具有至少一个点突变的二酰基甘油二酰基转移酶(DGAT)。

12.如权利要求1至11中任一项所述的重组核酸，该重组核酸进一步编码蔗糖转化酶。

13.如权利要求1至12中任一项所述的重组核酸，该重组核酸进一步编码抑制原始小球藻脂质生物合成基因表达的抑制性RNA。

14.一种表达盒，包含如权利要求1至13中任一项所述的重组核酸。

15.一种用如权利要求1至13中任一项所述的重组核酸转化的基因工程化微生物细胞。

16.如权利要求15所述的基因工程化微生物细胞，其中该细胞是无绿藻属或小球藻属细胞。

17.如权利要求16所述的基因工程化微生物细胞，其中该细胞是原始小球藻属细胞。

18.如权利要求17所述的细胞，其中所述细胞包含选自表1中列出基因的一种内源性脂质生物合成基因和一种或多种外源性原始小球藻脂质生物合成基因两者。

19.如权利要求18所述的细胞，其中所述外源基因编码脂质生物合成蛋白，并且其中该脂质生物合成蛋白的氨基酸序列与该内源性脂质生物合成蛋白一致。

20.如权利要求19所述的细胞，其中所述外源基因包含一个核苷酸序列，其中编码该脂质生物合成蛋白的氨基酸的核苷酸序列的密码子已经改变。

21.如权利要求15至20中任一项所述的细胞，其中所述外源基因编码与天然原始小球藻蛋白具有至少50％氨基酸一致性的蛋白。

22.如权利要求15至21中任一项所述的细胞，其中所述外源基因与非天然原始小球藻启动子的启动子元件可操作连接。

23.如权利要求15至22中任一项所述的细胞，其中所述外源基因与非天然原始小球藻非翻译控制元件的非翻译控制元件可操作连接。

24.如权利要求15至23中任一项所述的细胞，其中所述外源基因与编码非天然原始小球藻转运肽的转运肽的核苷酸序列可操作连接。

25.如权利要求24所述的细胞，其中该转运肽是质体靶向序列或线粒体靶向序列。

26.如权利要求15至25中任一项所述的细胞，其中该细胞具有与SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:60具有至少75％核苷酸一致性的23S rRNA序列。

27.如权利要求15至26中任一项所述的原始小球藻细胞，其中该细胞具有为至少10％C8-C14的脂肪酸谱。

28.如权利要求15至26中任一项所述的原始小球藻细胞，其中该细胞具有为至少50％C12的脂肪酸谱。