[发明专利]多分析物试验

说明书

相关申请的交叉参考

本申请要求分别于2012年10月5日和2013年3月4日提交的美国临时专利申请No.61/710,651和61/772,523的益处。将那些申请的每一篇的公开内容全部按引用并入本文中。

发明领域

本发明涉及利用固定于颗粒上的多价结合剂的结合试验，尤其是免疫试验。本发明还涉及增大颗粒的大小提高了筛选的灵敏度这一令人惊讶的发现。

发明背景

测试液体样品的细菌污染是各种领域中的重要组成部分，如医学(例如，测试用于输血的血样)、环境安全(例如，测试用于人使用的水样)和食品安全(例如，测试用于食用的食品和饮料样品)。细菌测试的重要性需要快速、灵敏和特异性足够宽泛以检测多种细菌种和属的测试。试验中的实际限制，如检测剂(例如，细菌抗原结合抗体)的量或“阳性”结果的可视性可以控制目前的细菌测试方法满足这些需求的能力。因此，需要用于快速、宽泛和灵敏地检测细菌的改良试剂、装置和方法。

发明简述

在第一个方面中，本发明提供了用于检测样品中的细菌的侧向流动装置，该装置包括用于样品的流动通道，并且进一步包括对于一种或多种细菌抗原特异性的全类属(pan-generic)结合剂，其中所述全类属结合剂固定于一群特定大小的可检测颗粒上；和捕获结合细菌抗原的颗粒群的捕获结合剂，其中捕获结合剂固定于流动通道上，并且其中可检测颗粒群沿着流动通道排列，使得样品在接触捕获结合剂之前接触可检测颗粒群。在一些实施方案中，可检测颗粒是化学发光、发光、荧光、磁或有色颗粒。为了方便，将使用术语“有色颗粒”，但本发明考虑了使用其他形式的可检测颗粒的实施方案。在利用有色颗粒的实施方案中，颗粒可以是金、银或铂颗粒。在一些实施方案中，颗粒直径为约60至约120nm。在一些实施方案中，颗粒直径为约80nm。

在一些实施方案中，全类属结合剂特异性地结合革兰氏阳性细菌抗原。在一些这样的实施方案中，全类属多克隆抗体结合脂磷壁酸(LTA)。在一些实施方案中，全类属结合剂特异性地结合革兰氏阴性细菌抗原。在一些这样的实施方案中，全类属多克隆抗体结合细菌脂多糖结构(LPS)。在一些实施方案中，至少一种全类属结合剂特异性地结合革兰氏阳性细菌抗原而至少一种全类属结合剂特异性地结合革兰氏阴性细菌抗原。在一些实施方案中，全类属结合剂能够结合三个或更多个属的细菌。在一些实施方案中，全类属结合剂通过衔接物固定于可检测颗粒上。在一些实施方案中，衔接物是蛋白A、蛋白G或蛋白L。

在一些实施方案中，全类属结合剂是抗体。在一些实施方案中，全类属结合剂包括两种或更多种全类属抗体，其中每种全类属抗体特异性地结合一种或多种细菌抗原。在各种实施方案中，每种全类属抗体固定于有色颗粒的分开亚群上或相同的亚群上。根据本发明，至少一种全类属抗体固定于一群特定大小的有色颗粒上。在一些实施方案中，可以将全类属结合剂与一种或多种非全类属的结合剂组合。例如，不是全类属的结合剂可以结合细菌的一个或多个种或菌株，但不是结合到多个属上。

在一些实施方案中，全类属抗体选自多克隆抗体、单克隆抗体以及多克隆和单克隆抗体的组合。在一些实施方案中，全类属抗体是多克隆的，并且结合多种细菌抗原。在一些实施方案中，全类属抗体是多克隆的并且结合多种革兰氏阳性细菌抗原。在一些实施方案中，全类属抗体是多克隆的并且结合多种革兰氏阴性细菌抗原。在一些实施方案中，全类属抗体是多克隆的，并且结合多种革兰氏阴性细菌抗原和革兰氏阳性细菌抗原。在一些实施方案中，至少一种全类属抗体是单克隆全类属抗体而至少一种全类属抗体是多克隆全类属抗体。

在一些实施方案中，全类属抗体特异性地结合革兰氏阳性细菌抗原。在一些实施方案中，全类属抗体特异性地结合革兰氏阴性细菌抗原。在一些实施方案中，至少一种全类属抗体特异性地结合革兰氏阳性细菌抗原而至少一种全类属抗体特异性地结合革兰氏阴性细菌抗原。在一些实施方案中，全类属抗体能够结合三个或多个属的细菌。在一些实施方案中，全类属结合抗体通过衔接物固定于有色颗粒上。