[发明专利]成纤维细胞生长因子21蛋白

说明书

本发明涉及成纤维细胞生长因子21(FGF21)蛋白质，含有FGF21蛋白的药物组合物，以及用于治疗2型糖尿病、肥胖、异常脂血症和/或代谢综合征的方法。

FGF21是一种激素，其作为葡萄糖和脂质内稳态的重要代谢调节物发挥作用。通过上调GLUT1表达，FGF21促进脂肪细胞中的葡萄糖摄取，其机制不同于胰岛素。在糖尿病啮齿动物和猴子中，人FGF21降低葡萄糖空腹血清浓度，并降低甘油三酯、胰岛素和胰高血糖素的空腹血清浓度。此外，在饮食诱导的肥胖啮齿类动物模型中，施用FGF21导致累计体重呈剂量依赖性丧失。因此，FGF21具有用于治疗糖尿病、肥胖、异常脂血症、代谢综合征的潜在效用。

在WO2010/042747、WO2010/285131和WO2009/149171中已经描述了FGF21蛋白。

与人野生型FGF21和已知的FGF21蛋白相关的问题是分子的短的体内半寿期、低的效力和/或药物不稳定性。因此，仍然需要一种长期作用的、有效和/或稳定的替代性FGF21蛋白。

本发明提供了替代性的FGF21蛋白。本发明的某些FGF21蛋白具有人野生型FGF21和本领域公开的已知的FGF21蛋白没有的优点。这些优点包括具有延长的半寿期、改善的效力和/或改善的药物稳定性。除改善的效力外，本发明的某些FGF21蛋白具有一种或多种有利的稳定性特征，这些特征对作为治疗性蛋白质的有效制备和/或配制是有用的，包括在体内降低的蛋白质水解降解、降低的对氧化的易感性、减少的在高浓度聚集的倾向、降低的在哺乳动物细胞系统中生产期间的翻译后修饰和蛋白水解水平、和/或改善的化学稳定性。另外，本发明的FGF21蛋白对2型糖尿病、肥胖、异常脂血症和/或代谢综合征的治疗具有潜在的作用。

本发明提供了FGF21蛋白，其中氨基酸序列由与第二多肽融合的第一多肽组成，其中第一多肽包含IgG4 Fc部分，其中Fc部分由抗体的铰链区、CH2和CH3恒定区结构域组成，第二多肽包含具有SEQ ID NO：1的氨基酸序列的FGF21蛋白，且其中第一多肽的C-末端通过接头与第二多肽的N-末端融合。

此外，本发明提供了这样的FGF21蛋白，其中氨基酸序列由与第二多肽融合的第一多肽组成，其中第一多肽包含具有SEQ ID NO：14的氨基酸序列的IgG4 Fc部分，第二多肽包含具有SEQ ID NO：1的氨基酸序列的FGF21蛋白，且其中第一多肽的C-末端通过接头与第二多肽的N-末端融合。

本发明还提供了这样的FGF21蛋白，其中氨基酸序列由与第二多肽融合的第一多肽组成，其中第一多肽包含具有SEQ ID NO：14的氨基酸序列的IgG4 Fc部分，第二多肽包含具有SEQ ID NO：1的氨基酸序列的FGF21蛋白，且其中第一多肽的C-末端通过具有SEQ ID NO：11的氨基酸序列的接头与第二多肽的N-末端融合。

本发明提供了这样的FGF21蛋白，其中氨基酸序列是

ESKYGPPCPPCPAPEAAGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSQEDPEVQFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQFNSTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKGLPSSIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSQEEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSRLTVDKSRWQEGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSLGHPIPDSSPLLQFGGQVRQRYLYTDDAQQTECHLEIREDGTVGCAADQSPESLLQLKALKPGVIQILGVKTSRFLCQRPDGALYGSLHFDPEACSFREDLKEDGYNVYQSEAHGLPLHLPGDKSPHRKPAPRGPARFLPLPGLPPALPEPPGILAPQPPDVGSSDPLRLVEPSQLRSPSFE(SEQ ID NO：5).

上述SEQ ID NO：5的FGF21蛋白包括SEQ ID NO：14的IgG4 Fc部分，表示为粗体的SEQ ID NO：11的接头序列，下划线的SEQ ID NO：1的FGF21蛋白。

此外，本发明提供了这样的FGF21蛋白，其中氨基酸序列是