[发明专利]一种用于过滤生物样品的方法有效
| 申请号: | 201380027561.4 | 申请日: | 2013-06-26 |
| 公开(公告)号: | CN104321423B | 公开(公告)日: | 2018-09-25 |
| 发明(设计)人: | 罗埃尔·彼得曼;巴特·凡米尔伯根 | 申请(专利权)人: | 拜奥卡蒂斯股份有限公司 |
| 主分类号: | C12N1/06 | 分类号: | C12N1/06;C12Q1/6883;C12Q1/689;C12Q1/04 |
| 代理公司: | 北京安信方达知识产权代理有限公司 11262 | 代理人: | 郑霞 |
| 地址: | 比利时*** | 国省代码: | 比利时;BE |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 用于 过滤 生物 样品 方法 | ||
1.一种用于过滤血液样品的方法,所述方法由下列步骤组成:
(a)提供带有血细胞并含有或怀疑含有微生物的血液样品;
(b)进行所述血细胞的选择性裂解来获得裂解的样品;
(c)在第一预定时间使步骤(b)中获得的所述裂解的样品过滤通过设置成保留所述微生物的过滤器;
(d)在第二预定时间通过使能够选择性地溶解被所述过滤器保留的除了所述微生物之外的物质的基于洗涤剂的清洗缓冲液通过所述过滤器,用所述基于洗涤剂的清洗缓冲液清洗所述过滤器,以从所述过滤器移除由除了所述微生物之外的所述物质组成的阻塞物,以便允许另外的过滤所述裂解的样品的步骤(c);
(e)重复步骤(c)至少1次,以便裂解的样品被完全过滤。
2.根据权利要求1所述的方法,其中所述第一预定时间范围为20至80秒,并且所述第二预定时间范围为5至25秒。
3.根据权利要求2所述的方法,其中所述第一预定时间范围为50至70秒。
4.根据权利要求2所述的方法,其中所述第一预定时间范围为55至65秒。
5.根据权利要求2所述的方法,其中所述第二预定时间范围为5至20秒。
6.根据权利要求2所述的方法,其中所述第二预定时间范围为5至15秒。
7.根据权利要求1所述的方法,其中除了所述微生物之外的所述物质是源于所述血细胞的蛋白质。
8.根据权利要求1所述的方法,其中所述基于洗涤剂的清洗缓冲液是pH大于5并且低于9的磷酸盐缓冲生理盐水溶液,并含有表面活性剂作为所述洗涤剂。
9.根据权利要求8所述的方法,其中所述表面活性剂是十二烷基硫酸钠(SDS),并且其中所述基于洗涤剂的清洗缓冲液含有0.2%和0.5%之间体积的十二烷基硫酸钠(SDS)。
10.根据权利要求1所述的方法,还包含在过滤所述裂解的样品的所述步骤(c)的过程中,检测所述过滤器的阻塞的步骤。
11.根据权利要求1所述的方法,其中血细胞的选择性裂解的所述步骤(b)包含:
(b1)加入裂解洗涤剂以及碱性缓冲液到所述血液样品的步骤,之后
(b2)孵育所述血液样品足够长的时间段来选择性地裂解所述血细胞的步骤。
12.根据权利要求1所述的方法,其中所述血液样品是哺乳动物血液样品。
13.根据权利要求12所述的方法,其中所述哺乳动物血液样品源于患有全身炎症反应综合征(SIRS)或心内膜炎的患者。
14.根据权利要求1所述的方法,还包含裂解所述微生物的步骤。
15.一种用于过滤血液样品的方法,所述方法包含下列步骤:
(a)提供带有血细胞并含有或怀疑含有微生物的血液样品;
(b)进行所述血细胞的选择性裂解来获得裂解的样品;
(c)在第一预定时间使步骤(b)中获得的所述裂解的样品过滤通过设置成保留所述微生物的过滤器;
(d)在第二预定时间通过使能够选择性地溶解被所述过滤器保留的除了所述微生物之外的物质的基于洗涤剂的清洗缓冲液通过所述过滤器,用所述基于洗涤剂的清洗缓冲液清洗所述过滤器,以从所述过滤器移除由除了所述微生物之外的所述物质组成的阻塞物,以便允许另外的过滤所述裂解的样品的步骤(c);
(e)重复步骤(c)至少1次,以便裂解的样品被完全过滤;
其中,所述方法用于非诊断目的。
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