[发明专利]用于扩增核酸的方法在审
| 申请号: | 201380007616.5 | 申请日: | 2013-02-01 |
| 公开(公告)号: | CN104093860A | 公开(公告)日: | 2014-10-08 |
| 发明(设计)人: | 约阿希姆·施特尔;费德里科·比尔斯根斯;拉尔斯·乌勒里希 | 申请(专利权)人: | GNA生物解决办法有限公司 |
| 主分类号: | C12Q1/68 | 分类号: | C12Q1/68 |
| 代理公司: | 北京品源专利代理有限公司 11332 | 代理人: | 巩克栋;杨生平 |
| 地址: | 德国普*** | 国省代码: | 德国;DE |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 扩增 核酸 方法 | ||
1.用于扩增核酸(1)的方法,其特征在于,在反应体积(2)中的纳米颗粒(8)通过激发将热传递至它们的环境。
2.根据权利要求1所述的方法,其特征在于,通过纳米颗粒(8)的激发,局部地加热纳米颗粒(8)的环境。
3.根据前述权利要求之一所述的方法,其特征在于,通过聚合酶链式反应扩增所述核酸(1)。
4.根据前述权利要求之一所述的方法,其特征在于,通过激光器(16)激发所述纳米颗粒(8)。
5.根据前述权利要求之一所述的方法,其特征在于,用寡核苷酸(4)缀合所述纳米颗粒(8)。
6.根据前述权利要求之一所述的方法,其特征在于,用正向引物(14)以及反向引物(15)缀合纳米颗粒(8)和寡核苷酸(4)的一类缀合物。
7.根据权利要求5或6所述的方法,其特征在于,在所述方法中,使用计数器序列(34),所述计数器序列(34)可以结合这样的寡核苷酸(4),所述寡核苷酸(4)本身已经脱离它们以前已经连接的纳米颗粒(8)。
8.根据权利要求5-7之一所述的方法,其特征在于,将填充分子(9)连接至纳米颗粒(8)。
9.根据权利要求5-8之一所述的方法,其特征在于,在所述纳米颗粒(8)上的寡核苷酸(4)含有间隔物序列(6)作为部分序列。
10.根据权利要求5-9之一所述的方法,其特征在于,通过纳米颗粒(8)的激发传递至纳米颗粒(8)的环境的热足以使纳米颗粒(8)的表面上的寡核苷酸(4)从与寡核苷酸(4)杂交的核酸(1)脱杂交。
11.根据前述权利要求之一所述的方法,其特征在于,所述方法包括总体加热步骤。
12.根据前述权利要求之一所述的方法,其特征在于,所述退火温度等于延伸温度。
13.根据前述权利要求之一所述的方法,其特征在于,在所述方法的任意一个时间,通过激发仅加热纳米颗粒(8)的一部分。
14.根据前述权利要求之一所述的方法,其特征在于,发生样品(11)相对于激发场的定向移动,使得在不同的时间,激发样品(11)的不同分体积中的纳米颗粒(8)。
15.根据前述权利要求之一所述的方法,其特征在于,在所述方法中,使用热不稳定的DNA聚合酶(11)。
16.根据前述权利要求之一所述的方法,其特征在于,使用测试探针(21),确定扩增反应的产物的浓度。
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