[发明专利]一株香味菌属菌株及其在制备烯丙基甲基硫醚中的应用

权利要求书

1.一株香味菌属菌株，菌株名为WTC05-2，分类命名为Myroides sp.，已于2013年1月9日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，保藏编号为CGMCC No.7113。

2.权利要求1所述的香味菌属菌株在制备烯丙基甲基硫醚中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用，其特征在于：应用时，包括以下步骤：

（1）菌种选择：选用权利要求1的菌株；

（2）菌种活化：将上述菌种划线于固体培养基，在30℃静置培养18小时，备用；

（3）种子培养：将上述步骤（2）培养的菌株用接种环挑取单菌落，接种于装有50mL液体种子培养基的300mL三角瓶中，置摇床中震荡培养，其转速为200转/分钟，30℃培养12小时，得种子液；

（4）发酵培养：以体积比为1.0%的接种量，将步骤（3）所得种子液继续接种于装有100mL发酵培养基的500mL摇瓶中，在30℃、转速为200转/分钟的条件下摇瓶培养42h，得发酵液；

（5）产物富集及纯化：向上述发酵液中加入D101大孔吸附树脂，提取24h，过滤，然后进行洗脱：先用水淋洗树脂，再用有机试剂淋洗树脂，收集有机试剂洗脱液，蒸除有机溶剂，即得烯丙基甲基硫醚。

4.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：还包括以下步骤（6）：上述有机试剂洗脱液的检测：采用气质联用（GC-MS）鉴定有机试剂洗脱液中是否含有烯丙基甲基硫醚，以及其浓度。

5.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述步骤（2）（3）（4）中的固体培养基、液体种子培养基、发酵培养基均为胰蛋白胨大豆肉汤培养基，其配方组成为：胰蛋白胨17g/L，植物蛋白胨3g/L，氯化钠5g/L，磷酸二氢钾2.5g/L，葡萄糖2.5g/L，pH7.2；固体培养基中还加入了浓度为2%的琼脂。

6.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述步骤（5）中的有机试剂为乙醚。

7.根据权利要求3所述的应用，其特征在于：所述步骤（5）具体为：按照20g/L添加量向上述发酵液中加入D101大孔吸附树脂，提取24h，以100目的绢布过滤，将树脂加入玻璃柱中，树脂装填高度10mm，按照2ml/min流速，先用4体积去离子水淋洗树脂，再用3体积的有机试剂淋洗树脂，收集第3柱体积的有机试剂洗脱液，即为含有烯丙基甲基硫醚的洗脱液，蒸除有机溶剂，即得烯丙基甲基硫醚。

8.根据权利要求3或7所述的应用，其特征在于：所述步骤（5）中的D101大孔吸附树脂，使用前需进行预先处理，处理方式为：用饱和食盐水浸泡18～20h,然后排尽食盐水，用水漂洗净，使排出的水不显黄色，再用质量百分数为2%～4%的氢氧化钠溶液浸泡2～4h，排尽碱液后，冲洗树脂直至水为中性。

9.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述步骤（6）中，GC-MS分析条件为：

（1）气相色谱条件：RTX-1色谱柱，柱温80℃，载气He，载气流量3.0ml/min；

（2）质谱检测条件为：检测器温度250℃，4.5min后开始检测，扫描质量范围45～700。