[发明专利]一种含有纤维素酶的小麦日粮酶及其制备方法

说明书

技术领域

本发明属于酶制剂领域，具体涉及一种小麦日粮酶及其制造方法。 

背景技术

随着养殖业发展对玉米需求量加大和国际市场上玉米行情的变化，造成玉米采购难和价格上扬，尤其在非玉米主产区，玉米的短缺成为限制当地畜牧业发展的重要因素。而在非玉米主产区往往小麦的来源较广，其价格也较为稳定，而且在小麦收获季节，其价格和玉米相比往往具有一定的优势，特别是随着我国小麦产量的逐渐增大，以及WTO的加入,进口小麦涌入带来的冲击,使得小麦价格呈下降趋势。同时,畜牧业发展迅速,饲料用量不断增大,制造淀粉和赖氨酸也消耗掉大量的玉米,以前主要用作能量饲料的玉米价格不断上涨,小麦以其种植面积广、产量高、价格低等优点成为替代玉米的首选。 

饲用酶种类繁多，在畜禽生产中均取得了相当好的效果。前苏联科学家在早期断奶仔猪日粮中添加淀粉糊精酶，使得日增重提高14.6%，碳水化合物消化率提高77.2%。据美国有关资料报道，Collier在早期断奶仔猪日粮中补充酶制剂（含蛋白酶、淀粉酶、葡聚糖酶），结果实验组比对照组日增重提高了25%，饲料转化率提高了15.5%。西德学者曾多次进行育肥猪添加复合酶制剂的实验研究，在以大麦为主的日粮中，添加0.1%的复合酶制剂，结果为：实验组比对照组生长速度提高5.1%，饲料利用率提高4.1%。可见，淀粉酶能显著提高畜禽对饲料的消化吸收，促进生长，降低饲料成本，并且作为一种绿色饲料添加剂，它的使用具有安全性，有利于畜牧业生产走上经济节约型的发展道路。 

目前，粮食的短缺是困扰我国饲料工业发展的主要因素。因此，要选择有利于节约粮食资源的畜牧业发展道路，提高饲料利用率，充分利用有限的粮食资源获得尽可能多的畜产品。酶制剂的使用能有效的解决这个问题，但目前在生产、实验中的实际应用的纤维素酶酶活力大多较低，因此也成为改善饲用酶应用现状的瓶颈之一。 

发明内容

本发明的目的在于提供一种复配的小麦日粮酶及其制备方法。 

本发明的目的可以通过以下技术方案来实现： 

一种小麦日粮酶，由以下重量份数的组分组成：黄芪粉0.5-2份，木聚糖酶20-40份，纤维素酶5-12份，β-葡聚糖酶及其培养物10-20份，中温α-淀粉酶2-8份。 

所述木聚糖酶和中温α-淀粉酶均为湖南鸿鹰翔生物工程股份有限公司产品； 

所述纤维素酶制备方法如下： 

利用里氏木霉菌株，通过紫外诱变、培养、发酵生产纤维素酶； 

里氏木霉菌株接种到斜面活化培养基上，逐级扩大培养制备种子液，培养时间为72-96小时；种子液按发酵液体积5-10％的接种量接种于发酵培养基中，20-35℃培养96-144小时，即里氏木霉发酵生产纤维素酶结束；将发酵液在4000-600orpm离心，收集所得液体为粗酶液；得到的粗酶液进行超浓缩过滤，干燥得到。 

所述菌株的种子液接种于发酵培养基中，25℃培养104小时，发酵液纤维素酶的外切β-葡聚糖酶及其培养物、内切β-葡聚糖酶及其培养物、β-葡萄糖苷酶和滤纸酶活力分别达到680U/mL、1389U/mL、486U/mL和792U/mL。 

所述纤维素酶的生产菌种为里氏木霉(Trichodema reesei)601-17，该菌株于2013年11月3日保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号为CCTCC NO：M2013540，分类命名为里氏木霉601-17Trichodema reesei601-17，保藏地址：中国.武汉.武汉大学，邮编430072。 

所述菌株产纤维素酶的最适pH3.0-6.0；最适温度为23～35℃。 

所述菌株生理生化特征： 

该菌株在PDA固体培养基上生长，形成的菌落特征为菌落呈棉絮状，菌落呈淡绿色，菌落扁平，高0.1-0.75mm，菌落边缘白色，整齐；生长速度快，48h菌落直径达1.0-8.5mm,72h达30-50mm；菌丝白色，有隔膜，菌丝壁光滑，直径在2-5ūm。分生孢子梗从菌丝的短侧枝发生，侧枝上对生。分生孢子梗呈瓶状，直立，无色，孢子呈球形，绿色，直径20-100ūm。 

该菌株可在麦麸上生长，主要代谢产物为纤维素酶（内切纤维素酶、外切纤维素酶和葡萄糖苷酶）。根据《An Introduction industrial mycology》（George Smith1954）、《真菌鉴定手册》（魏景超1982）、《常见与常用真菌》（中科院微生物研究所1973)，鉴定该菌株为：里氏木霉。 

所述β-葡聚糖酶及其培养物制备方法如下：