[发明专利]一种β-酪蛋白单克隆抗体的制备方法和β-酪蛋白胶体金检测试纸条及其制备方法

权利要求书

1.一种β-酪蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a.动物免疫注射：将β-酪蛋白作为抗原免疫Balb/c小鼠，进行免疫以及加强免疫；

b.制备杂交瘤细胞：取免疫效果最佳的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0进行融合，以β-酪蛋白、αs1-酪蛋白和κ-酪蛋白作为检测抗原，通过酶联免疫吸附试验检测杂交瘤细胞的上清进行筛选，保留阳性孔，经过亚克隆获得能稳定分泌抗β-酪蛋白的单克隆抗体的杂交瘤细胞株后；

c.对小鼠腹腔注射杂交瘤细胞，采集腹水以及对腹水纯化获得β-酪蛋白单克隆抗体。

2.根据权利要求1所述的一种β-酪蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤a中各次的免疫注射剂量是50-100μg/只。

3.根据权利要求1所述的一种β-酪蛋白单克隆抗体的制备方法，其特征在于，所述步骤b中，将小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞SP2/0按2-10:1的比例进行细胞融合。

4.一种β-酪蛋白胶体金检测试纸条，该试纸条含有衬板和在衬板上依次衔接的样品垫、金标结合垫、纤维素膜和吸水垫，其特征在于：所述金标结合垫为吸附β-酪蛋白金标抗体的结合垫，所述纤维素膜上有一条检测带和一条质控带，分别是含β-酪蛋白的检测带和羊抗鼠抗体的质控带。

5.根据权利要求4所述的一种β-酪蛋白胶体金检测试纸条，其特征在于，所述试纸条是多层结构的窄条薄片，具体结构是：底层是衬板，衬板中部叠置粘贴纤维素膜，衬板一端部上叠置粘贴吸水垫，衬板另一端部上叠置粘贴样品垫，吸水垫内端与样品垫内端各自分别与纤维素膜一端搭接，在样品垫与纤维素膜的搭接处，两者之间夹置粘贴一段金标结合垫。

6.根据权利要求4或5任意一项所述的一种β-酪蛋白胶体金检测试纸条，其特征在于，所述的衬板为硬质塑胶条或不吸水硬纸条。

7.根据权利要求4或5任意一项所述的一种β-酪蛋白胶体金检测试纸条，其特征在于，所述的样品垫及结合垫分别为玻璃纤维膜、尼龙膜、聚偏二氟乙烯膜或聚酯膜任意一种。

8.根据权利要求4或5任意一项所述的一种β-酪蛋白胶体金检测试纸条，其特征在于，所述的纤维素膜为硝酸纤维素膜或羧化纤维素膜。

9.根据权利要求4或5任意一项所述的一种β-酪蛋白胶体金检测试纸条，其特征在于，所述的吸水垫为吸水能力较强的吸水滤纸或滤油纸。

10.一种β-酪蛋白胶体金检测试纸条的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

a).胶体金颗粒的制备；

b).胶体金标记β-酪蛋白单克隆抗体，并将标记后的β-酪蛋白金标抗体吸附于金标结合垫上；

c).将β-酪蛋白和羊抗鼠抗体分别吸附于硝酸纤维素膜检测线和质控线位置上；

d).组装胶体金试纸条，将吸水垫、纤维素膜、金标结合垫和样品垫从上到下依次固定于衬板上，即成β-酪蛋白胶体金检测试纸条。