[发明专利]一株淡紫拟青霉及其培养方法和在作物病虫防治上的应用有效
| 申请号: | 201310669589.X | 申请日: | 2013-12-12 |
| 公开(公告)号: | CN104212722A | 公开(公告)日: | 2014-12-17 |
| 发明(设计)人: | 谢明;张艳军;张召荣 | 申请(专利权)人: | 谢明 |
| 主分类号: | C12N1/14 | 分类号: | C12N1/14;A01N63/04;A01P7/04;A01P5/00;C12R1/79 |
| 代理公司: | 暂无信息 | 代理人: | 暂无信息 |
| 地址: | 100081 北京市中关村南大*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 淡紫 青霉 及其 培养 方法 作物 病虫 防治 应用 | ||
1.一种淡紫拟青霉,其特征为淡紫拟青霉(Paecilomyces lilacinus)CPLI0708,保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心,保藏号为CGMCC No.8450。
2.权利要求1所述的一种淡紫拟青霉菌株,其特征在于:所述淡紫拟青霉菌株属丝孢目、拟青霉属:在PDA平板上菌落呈白色,产孢后逐渐变成浅粉红色,培养7d后,菌落呈紫红色、圆形、隆起、粉状,表面没有分泌物;淡紫拟青霉的分生孢子梗末端膨大;分生孢子为单细胞,椭圆形至纺锤形,呈链状、平滑、无色至黄色,2.5μm~4μm宽,孢梗上具有瓶颈状不规则的分枝或轮生分枝,瓶梗基部较宽;淡紫拟青霉(P.lilacinus)CPLI0708菌株生长温度范围可以从12℃~36℃,生长和产孢的最适温度范围是25℃~28℃,10℃和40℃时停止生长,36℃时停止产孢;该菌株在不同培养基上生长和产孢差异较大,菌株7天在葡萄糖培养基上菌落直径为1.845cm,麦芽糖培养基上为2.643cm,蔗糖培养基上为1.796cm,可溶性淀粉培养基上为1.982cm,乳糖培养基上为1.945cm,甘油培养基上为1.935cm;菌株13天在葡萄糖培养基上产孢量为3.264×109个孢子/ml,麦芽糖上为20.88×109个孢子/ml,蔗糖上为1.968×109个孢子/ml,可溶性淀粉上为5.088×109个孢子/ml,乳糖上为3.984×109个孢子/ml,甘油上为2.64×109个孢子/ml;菌株培养7天,在硝酸钾培养基上的菌落直径为2.072cm,在硫酸铵培养基上的菌落直径为1.916cm,在蛋白胨培养基上的菌落直径为2.431cm,在酵母浸粉培养基上的菌落直径为2.621cm,在脲培养基上的菌落直径为2.212cm,在硝酸钠培养基上的菌落直径为1.712cm;菌株培养13天,在硝酸钾培养基上产孢为18.72×108个孢子/ml,在硫酸铵培养基上产孢为7.2×108个孢子/ml,在蛋白胨培养基上产孢为31.2×108个孢子/ml,在酵母浸粉培养基上产孢为11.04×108个孢子/ml,在脲培养基上产孢为19.68×108个孢子/ml,在硝酸钠培养基上产孢为10.08×108个孢子/ml;菌株在改良的PDA培养基上,15℃下的菌落生长直径为0.632cm,19℃下的菌落生长直径为1.077cm,23℃下的菌落生长直径为1.389cm,27℃下的菌落生长直径为1.4cm,29℃下的菌落生长直径为2.202cm,31℃下的菌落生长直径为1.932cm;菌株在在改良的PDA培养基上,15℃下的产孢为11.79×106个孢子/ml,19℃下的产孢为8.73×106个孢子/ml,23℃下的产孢为56.16×106个孢子/ml,27℃下的产孢为35.46×106个孢子/ml,29℃下的产孢为116.888×106个孢子/ml,31℃下的产孢为107.46×106个孢子/ml。
3.权利要求1所述的一种淡紫拟青霉的培养方法,其步骤是:
A、淡紫拟青霉(P.lilacinus)CPLI0708的活化:将淡紫拟青霉(P.lilacinus)CPLI0708菌株划线培养于PDA斜面上,于25℃条件下培养6d~8d;
B、淡紫拟青霉(P.lilacinus)CPLI0708的液体发酵培养:将5ml无菌水倒入活化的淡紫拟青霉(P.lilacinus)CPLI0708菌株斜面上,用旋涡震荡器将真菌孢子洗下获得孢子悬浮液,将孢子悬浮液接种到装有200ml液体培养基(葡萄糖25g,酵母浸粉20g,蒸馏水1000ml)的500ml三角瓶中,于180rmp/min,25℃条件下振荡培养2d~3d;
C、淡紫拟青霉(P.lilacinus)CPLI0708的固体发酵培养:将载体、营养基质和水按体积比6:1:1混合均匀制的固体发酵培养基,按每袋200ml装入聚乙烯保鲜袋,121℃灭菌0.5h~1h,冷却后,将步骤2的淡紫拟青霉(P.lilacinus)CPLI0708液体发酵菌液按5%~10%的体积比接种到固体发酵培养基中,再次搅拌均匀,26℃~28℃培养6d~10d。
4.权利要求1所述的一种淡紫拟青霉菌株在防治保护地害虫(蚜虫、粉虱等)和大豆孢囊线虫中的应用。
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