[发明专利]鱼翅食品中鲨鱼成分快速检测试剂盒及其检测方法有效
| 申请号： | 201310625684.X | 申请日： | 2013-11-29 |
| 公开（公告）号： | CN103642911A | 公开（公告）日： | 2014-03-19 |
| 发明（设计）人： | 覃芳芳;吴玉銮;罗海英;冼燕萍;王德莲;陈立伟;蔡玮红;侯向昶;郭新东;罗东辉 | 申请（专利权）人： | 广州市质量监督检测研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/68 | 分类号： | C12Q1/68 |
| 代理公司： | 广州华进联合专利商标代理有限公司 44224 | 代理人： | 万志香;郭元杰 |
| 地址： | 510115 *** | 国省代码： | 广东;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鱼翅 食品 鲨鱼 成分 快速 检测 试剂盒 及其 方法 | ||
1.一种鱼翅食品中鲨鱼成分PCR检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）提取待测样品的DNA为模板；
（2）以SEQIDNO:1和SEQIDNO:2为引物，进行PCR扩增；
（3）电泳鉴定。
2.根据权利要求1所述的鱼翅食品中鲨鱼成分PCR检测方法，其特征在于，DNA的提取包括：称取样品，粉碎，加入DNA提取缓冲液，将溶液在40～65℃下放置20～40min，加入体积比为25:24:1的苯酚：氯仿：异戊醇混合液进行提取；离心取上清，用体积比为24:1的氯仿:异戊醇混合液进行提取；离心取上清，加入等体积异丙醇，4～10℃放置0.5～2小时，高速离心，获得DNA沉淀，再用70%的乙醇溶液洗沉淀物，沉淀物加水溶解，即得样品DNA。
3.根据权利要求2所述的鱼翅食品中鲨鱼成分PCR检测方法，其特征在于，所述每克样品与DNA提取缓冲液体积的比例为1:4～8（g:mL）。
4.一种鱼翅食品中鲨鱼成分实时荧光PCR检测方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）提取待测样品的DNA为模板；
（2）以SEQIDNO:1和SEQIDNO:2为引物，SEQIDNO:3为探针，进行实时荧光PCR扩增。
5.根据权利要求4所述的鱼翅食品中鲨鱼成分PCR检测方法，其特征在于，DNA的提取包括：称取样品，粉碎，加入DNA提取缓冲液，将溶液在40～65℃下放置20～40min，加入体积比为25:24:1的苯酚:氯仿:异戊醇混合液进行提取；离心取上清，用体积比为24:1的氯仿:异戊醇混合液进行提取；离心取上清，加入等体积异丙醇，4～10℃放置0.5～2小时，高速离心，获得DNA沉淀，再用70%的乙醇溶液洗沉淀物，沉淀物加水溶解，即得样品DNA。
6.根据权利要求5所述的鱼翅食品中鲨鱼成分PCR检测方法，其特征在于，所述每克样品与DNA提取缓冲液体积的比例为1:4～8（g:mL）。
7.根据权利要求4所述的鱼翅食品中鲨鱼成分PCR检测方法，其特征在于，步骤（2）实时荧光PCR扩增结果为样品不含鲨鱼成分时，则以步骤（1）提取的DNA为模板，以SEQIDNO:1和SEQIDNO:2为引物，进行PCR扩增和电泳鉴定。
8.一种鱼翅食品中鲨鱼成分PCR检测试剂盒，其特征在于，包括SEQIDNO:1和SEQIDNO:2所示引物。
9.一种鱼翅食品中鲨鱼成分实时荧光PCR检测试剂盒，其特征在于，包括SEQIDNO:1和SEQIDNO:2所示引物，以及SEQIDNO:3所示探针。
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