[发明专利]仿肝板结构肝细胞三维培养装置及其培养方法有效
| 申请号: | 201310593883.7 | 申请日: | 2013-11-20 |
| 公开(公告)号: | CN103614297A | 公开(公告)日: | 2014-03-05 |
| 发明(设计)人: | 高毅;贾志栋;李阳 | 申请(专利权)人: | 南方医科大学珠江医院 |
| 主分类号: | C12M3/00 | 分类号: | C12M3/00;C12N5/071 |
| 代理公司: | 北京市立方律师事务所 11330 | 代理人: | 刘延喜;王增鑫 |
| 地址: | 510282 广东*** | 国省代码: | 广东;44 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 板结 肝细胞 三维 培养 装置 及其 方法 | ||
1.一种仿肝板结构肝细胞三维培养装置,其特征在于,包括微流控芯片;所述微流控芯片内开设依次直线连接且相通的第一主通道、第二主通道和第三主通道;所述第一主通道远离第二主通道的一端、第一主通道与第二主通道的连接处及第二主通道与第三主通道的连接处均对称延伸形成两个分支通道,所述第一主通道远离第二主通道的一端同时直线延伸形成一分支通道;所述分支通道的末端均设置与相应分支通道导通的导料管,所述导料管内开设有导通孔且导料管垂直于相应的分支通道所在面,以用于通入形成肝板结构所需的原料。
2.根据权利要求1所述的装置,其特征在于,所述芯片为聚二甲硅氧烷微流控芯片。
3.根据权利要求2所述的装置,其特征在于,所述主通道和分支通道的深度均为160μm。
4.根据权利要求3所述的装置,其特征在于,所述第一主通道的长、宽为300μm、100μm;
所述第二主通道的长、宽为300μm、200μm;
所述第三主通道的长、宽为50mm、400μm。
5.根据权利要求4所述的装置,其特征在于,所述第一主通道远离第二主通道的一端对称延伸形成的两个分支通道的夹角为60°;
所述第一主通道与第二主通道连接处对称延伸形成的两个分支通道的夹角为120°;
所述第二主通道与第三主通道连接处对称延伸形成的两个分支通道的夹角为180°。
6.根据权利要求5所述的装置,其特征在于,所述每个分支通道的宽度均为100μm;
所述第一主通道远离第二主通道的一端直线延伸形成的分支通道的长度为300μm;
所述第一主通道远离第二主通道的一端对称延伸形成的两个分支通道,其与第一主通道相接的一边长均为560μm,与第一主通道直线延伸的分支通道相接的一边长均为416μm;
所述第一主通道与第二主通道的连接处对称延伸形成的两个分支通道的边长为693μm;
所述第二主通道与第三主通道的连接处对称延伸形成的两个分支通道,其与第二主通道相接的一边长均为500μm,与第三主通道相接的一边长均为400μm。
7.根据权利要求6所述的装置,其特征在于,所述导料管的高度为2420μm,其导通孔的直径为100μm。
8.一种仿肝板结构肝细胞三维培养方法,其特征在于,包括以下步骤:
将含肝细胞的海藻酸钠溶液、含内皮细胞的海藻酸钠溶液、缓冲液及胶凝液分别加入仿肝板结构肝细胞三维培养装置;
将所述仿肝板结构肝细胞三维培养装置形成的包裹有肝板结构的水凝胶导出所述装置,并置于培养基中进行培养;
培养完成后,降解所述水凝胶,获得肝板组织;
所述仿肝板结构肝细胞三维培养装置包括微流控芯片;所述微流控芯片内开设依次直线连接且相通的第一主通道、第二主通道和第三主通道;所述第一主通道远离第二主通道的一端、第一主通道与第二主通道的连接处及第二主通道与第三主通道的连接处均对称延伸形成两个分支通道,所述第一主通道远离第二主通道的一端同时直线延伸形成一分支通道;所述分支通道的末端均设置与相应分支通道导通的导料管,所述导料管内开设有导通孔且导料管垂直于相应的分支通道所在面,以用于通入所述含肝细胞的海藻酸钠溶液、含内皮细胞的海藻酸钠溶液、缓冲液及胶凝液。
9.根据权利要求8所述的方法,其特征在于,所述将含肝细胞的海藻酸钠溶液、含内皮细胞的海藻酸钠溶液、缓冲液及胶凝液分别加入仿肝板结构肝细胞三维培养装置的步骤包括:
通过第一主通道与第二主通道连接处的两个分支通道末端的导料管分别通入缓冲液;
通过第一主通道一端直线延伸形成的分支通道末端的导料管通入含肝细胞的海藻酸钠溶液,同时,通过第一主通道的一端对称延伸形成的两个分支通道末端的导料管分别通入含内皮细胞的海藻酸钠溶液;
通过第二主通道与第三主通道连接处的两个分支通道末端的导料管分别通入胶凝液。
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